山东大学学报(医学版)
山東大學學報(醫學版)
산동대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2003年
5期
469-471
,共3页
巨噬细胞游走抑制因子%小鼠%基因表达%大肠杆菌
巨噬細胞遊走抑製因子%小鼠%基因錶達%大腸桿菌
거서세포유주억제인자%소서%기인표체%대장간균
目的:获得足够量的高纯度小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)重组蛋白.方法:酶切重组克隆质粒pMD18-MIF,将片段插入原核表达载体pQE31,构建相应的重组表达质粒pQE31-MIF,将此质粒转化大肠杆菌M15,得到转化子.经IPTG诱导表达后进行菌体蛋白的Western blotting免疫印迹分析,并用Ni-NTA凝胶进行纯化.结果:MIF基因重组体构建成功,克隆的目的基因片段在M15中产生的融合表达产物在Western blotting检测中具有与抗MIF单克隆抗体发生特异性结合反应的特性.得到了纯化的目的蛋白.结论:MIF基因片段可在大肠杆菌中有效表达,表达产物可以与抗MIF单克隆抗体发生特异性结合反应,并得到纯化的MIF.
目的:穫得足夠量的高純度小鼠巨噬細胞移動抑製因子(MIF)重組蛋白.方法:酶切重組剋隆質粒pMD18-MIF,將片段插入原覈錶達載體pQE31,構建相應的重組錶達質粒pQE31-MIF,將此質粒轉化大腸桿菌M15,得到轉化子.經IPTG誘導錶達後進行菌體蛋白的Western blotting免疫印跡分析,併用Ni-NTA凝膠進行純化.結果:MIF基因重組體構建成功,剋隆的目的基因片段在M15中產生的融閤錶達產物在Western blotting檢測中具有與抗MIF單剋隆抗體髮生特異性結閤反應的特性.得到瞭純化的目的蛋白.結論:MIF基因片段可在大腸桿菌中有效錶達,錶達產物可以與抗MIF單剋隆抗體髮生特異性結閤反應,併得到純化的MIF.
목적:획득족구량적고순도소서거서세포이동억제인자(MIF)중조단백.방법:매절중조극륭질립pMD18-MIF,장편단삽입원핵표체재체pQE31,구건상응적중조표체질립pQE31-MIF,장차질립전화대장간균M15,득도전화자.경IPTG유도표체후진행균체단백적Western blotting면역인적분석,병용Ni-NTA응효진행순화.결과:MIF기인중조체구건성공,극륭적목적기인편단재M15중산생적융합표체산물재Western blotting검측중구유여항MIF단극륭항체발생특이성결합반응적특성.득도료순화적목적단백.결론:MIF기인편단가재대장간균중유효표체,표체산물가이여항MIF단극륭항체발생특이성결합반응,병득도순화적MIF.
