科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2000年
6期
617-622
,共6页
秦红敏%郭洪年%贾燕涛%李利红%田颖川
秦紅敏%郭洪年%賈燕濤%李利紅%田穎川
진홍민%곽홍년%가연도%리리홍%전영천
TMV-RNA非翻译区%GUS基因%转基因烟草
TMV-RNA非翻譯區%GUS基因%轉基因煙草
TMV-RNA비번역구%GUS기인%전기인연초
利用GUS基因及TMV-RNA非翻译区序列构建了4种GUS基因的植物表达载体,即 pBG437, pBG438,pBG440和pBG440△NOS. 在这4种表达载体中带双增强子的35S启动子的下游分别由GUS-NOS,Ω-GUS-NOS,Ω-GUS-3′UTR-NOS和Ω-GUS-3′UTR 组成4个不同的表达框架. 转基因烟草GUS活性检测表明,转pBG440植株的GUS活性是转pBG437的5倍,是转pBG438的1.6倍;转pBG438的GUS活性是转pBG437的3.2倍;转pBG440△NOS 的植株均没有检测到活性. 在前3组植物之间GUS表达水平的差异达显著水平. 同样载体在另一种烟草中进行瞬间表达的结果与上述基本一致. 以上结果在整体植株水平上证明Ω片段能显著提高外源基因的表达水平,但与用原生质体体系所得的结果有所不同,在转基因植物中3′UTR似乎不能起poly(A)的作用,也不能作为转录终止子. Ω片段与TMV 3′UTR区共同作用时,提高外源基因表达水平的效果更好.
利用GUS基因及TMV-RNA非翻譯區序列構建瞭4種GUS基因的植物錶達載體,即 pBG437, pBG438,pBG440和pBG440△NOS. 在這4種錶達載體中帶雙增彊子的35S啟動子的下遊分彆由GUS-NOS,Ω-GUS-NOS,Ω-GUS-3′UTR-NOS和Ω-GUS-3′UTR 組成4箇不同的錶達框架. 轉基因煙草GUS活性檢測錶明,轉pBG440植株的GUS活性是轉pBG437的5倍,是轉pBG438的1.6倍;轉pBG438的GUS活性是轉pBG437的3.2倍;轉pBG440△NOS 的植株均沒有檢測到活性. 在前3組植物之間GUS錶達水平的差異達顯著水平. 同樣載體在另一種煙草中進行瞬間錶達的結果與上述基本一緻. 以上結果在整體植株水平上證明Ω片段能顯著提高外源基因的錶達水平,但與用原生質體體繫所得的結果有所不同,在轉基因植物中3′UTR似乎不能起poly(A)的作用,也不能作為轉錄終止子. Ω片段與TMV 3′UTR區共同作用時,提高外源基因錶達水平的效果更好.
이용GUS기인급TMV-RNA비번역구서렬구건료4충GUS기인적식물표체재체,즉 pBG437, pBG438,pBG440화pBG440△NOS. 재저4충표체재체중대쌍증강자적35S계동자적하유분별유GUS-NOS,Ω-GUS-NOS,Ω-GUS-3′UTR-NOS화Ω-GUS-3′UTR 조성4개불동적표체광가. 전기인연초GUS활성검측표명,전pBG440식주적GUS활성시전pBG437적5배,시전pBG438적1.6배;전pBG438적GUS활성시전pBG437적3.2배;전pBG440△NOS 적식주균몰유검측도활성. 재전3조식물지간GUS표체수평적차이체현저수평. 동양재체재령일충연초중진행순간표체적결과여상술기본일치. 이상결과재정체식주수평상증명Ω편단능현저제고외원기인적표체수평,단여용원생질체체계소득적결과유소불동,재전기인식물중3′UTR사호불능기poly(A)적작용,야불능작위전록종지자. Ω편단여TMV 3′UTR구공동작용시,제고외원기인표체수평적효과경호.