福建医药杂志
福建醫藥雜誌
복건의약잡지
FUJIAN MEDICAL JOURNAL
2003年
2期
106-108
,共3页
程烽%卢爱薇%谢飞%兰风华
程烽%盧愛薇%謝飛%蘭風華
정봉%로애미%사비%란풍화
β2糖蛋白Ⅰ%分子克隆%原核表达
β2糖蛋白Ⅰ%分子剋隆%原覈錶達
β2당단백Ⅰ%분자극륭%원핵표체
目的构建β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)的原核表达载体并诱导其表达.方法利用PCR技术从β2-GPI昆虫表达载体中扩增出编码β2-GPI目的DNA片段,将其插入GST融合表达载体pGEX-2T多克隆位点,以IPTG诱导GST融合β2-GPI的表达.结果凝胶电泳显示昆虫表达载体的PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符.对重组质粒(pGEX-2T-β2-GPI)分析表明,插入片段的序列与发表的β2-GPI基因编码序列一致.在IPTG的诱导下,BL21重组菌高效表达出一个分子量约为64kDa产物,与预期相符.结论β2-GPI编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-2T.
目的構建β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)的原覈錶達載體併誘導其錶達.方法利用PCR技術從β2-GPI昆蟲錶達載體中擴增齣編碼β2-GPI目的DNA片段,將其插入GST融閤錶達載體pGEX-2T多剋隆位點,以IPTG誘導GST融閤β2-GPI的錶達.結果凝膠電泳顯示昆蟲錶達載體的PCR擴增產物的分子量大小與目的片段大小相符.對重組質粒(pGEX-2T-β2-GPI)分析錶明,插入片段的序列與髮錶的β2-GPI基因編碼序列一緻.在IPTG的誘導下,BL21重組菌高效錶達齣一箇分子量約為64kDa產物,與預期相符.結論β2-GPI編碼序列已被剋隆至GST融閤錶達載體pGEX-2T.
목적구건β2당단백Ⅰ(β2-GPI)적원핵표체재체병유도기표체.방법이용PCR기술종β2-GPI곤충표체재체중확증출편마β2-GPI목적DNA편단,장기삽입GST융합표체재체pGEX-2T다극륭위점,이IPTG유도GST융합β2-GPI적표체.결과응효전영현시곤충표체재체적PCR확증산물적분자량대소여목적편단대소상부.대중조질립(pGEX-2T-β2-GPI)분석표명,삽입편단적서렬여발표적β2-GPI기인편마서렬일치.재IPTG적유도하,BL21중조균고효표체출일개분자량약위64kDa산물,여예기상부.결론β2-GPI편마서렬이피극륭지GST융합표체재체pGEX-2T.
