中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2003年
2期
4-6
,共3页
杜绍财%张敏%韩建德%吴娟%冯百芳%陶其敏
杜紹財%張敏%韓建德%吳娟%馮百芳%陶其敏
두소재%장민%한건덕%오연%풍백방%도기민
UDG%稳定剂%微孔板DNA杂交%PCR
UDG%穩定劑%微孔闆DNA雜交%PCR
UDG%은정제%미공판DNA잡교%PCR
目的:了解94℃灭活UDG与不灭活及扩增产物加稳定剂与不加稳定剂对DNA杂交效率的影响.方法:采用微孔板DNA杂交技术检测PCR扩增dU-DNA杂交效果.以不加UDG组DNA杂交A值为对照、计算杂交百分率.结果:不加UDG组扩增前后未经94℃灭活处理-20℃保存20h杂交效率为90.293%,加UDG组在4℃、室温、37℃放置20h,杂交效率为20.15%,21.37%,29.37%.加UDG并增加94℃灭活步骤、37℃水浴放置20h,杂交效率为73.57%,78.82%.在此基础上加入稳定剂37℃水浴43h杂交效率达到99.88%～100%.37℃水浴67h杂交效率仍达到86.06%～97.10%.结论:上述结果证实用于抗污染时,扩增前后增设94℃灭活10min可提高杂交效率.加入稳定剂可使杂交A值1.80达到对照组A值1.81水平.提示稳定剂对保护PCR扩增dU-DNA有极其重要作用.
目的:瞭解94℃滅活UDG與不滅活及擴增產物加穩定劑與不加穩定劑對DNA雜交效率的影響.方法:採用微孔闆DNA雜交技術檢測PCR擴增dU-DNA雜交效果.以不加UDG組DNA雜交A值為對照、計算雜交百分率.結果:不加UDG組擴增前後未經94℃滅活處理-20℃保存20h雜交效率為90.293%,加UDG組在4℃、室溫、37℃放置20h,雜交效率為20.15%,21.37%,29.37%.加UDG併增加94℃滅活步驟、37℃水浴放置20h,雜交效率為73.57%,78.82%.在此基礎上加入穩定劑37℃水浴43h雜交效率達到99.88%～100%.37℃水浴67h雜交效率仍達到86.06%～97.10%.結論:上述結果證實用于抗汙染時,擴增前後增設94℃滅活10min可提高雜交效率.加入穩定劑可使雜交A值1.80達到對照組A值1.81水平.提示穩定劑對保護PCR擴增dU-DNA有極其重要作用.
목적:료해94℃멸활UDG여불멸활급확증산물가은정제여불가은정제대DNA잡교효솔적영향.방법:채용미공판DNA잡교기술검측PCR확증dU-DNA잡교효과.이불가UDG조DNA잡교A치위대조、계산잡교백분솔.결과:불가UDG조확증전후미경94℃멸활처리-20℃보존20h잡교효솔위90.293%,가UDG조재4℃、실온、37℃방치20h,잡교효솔위20.15%,21.37%,29.37%.가UDG병증가94℃멸활보취、37℃수욕방치20h,잡교효솔위73.57%,78.82%.재차기출상가입은정제37℃수욕43h잡교효솔체도99.88%～100%.37℃수욕67h잡교효솔잉체도86.06%～97.10%.결론:상술결과증실용우항오염시,확증전후증설94℃멸활10min가제고잡교효솔.가입은정제가사잡교A치1.80체도대조조A치1.81수평.제시은정제대보호PCR확증dU-DNA유겁기중요작용.
