科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2002年
16期
1242-1246
,共5页
CRP-cAMP nifU启动子 基因调控
CRP-cAMP nifU啟動子 基因調控
CRP-cAMP nifU계동자 기인조공
在大肠杆菌中,碳代谢总体调控蛋白CRP抑制肺炎克氏杆菌nifU启动子的表达.序列分析表明,nifU启动子上游有一个CRP靶位点,且该位点与已知的NifA靶位点重合.体外凝胶阻滞实验结果表明,CRP对该位点的亲和性与对乳糖操纵子的CRP靶位点相似,说明在生理条件下,CRP可与NifA激活蛋白竞争该靶位点.该位点突变的体外凝胶阻滞实验结果表明,CRP不再与突变的nifU启动子结合.体内活性检测结果显示,在组成性表达NifA蛋白的激活下,CRP对上游CRP靶位点突变的nifU启动子依然有抑制作用,其程度与野生型启动子无明显差异.因此,CRP对nifU启动子的抑制作用不依赖于该启动子上游特异的CRP靶位点,暗示CRP与E?54RNA聚合酶间的直接相互作用在该抑制效应中起着主要作用.
在大腸桿菌中,碳代謝總體調控蛋白CRP抑製肺炎剋氏桿菌nifU啟動子的錶達.序列分析錶明,nifU啟動子上遊有一箇CRP靶位點,且該位點與已知的NifA靶位點重閤.體外凝膠阻滯實驗結果錶明,CRP對該位點的親和性與對乳糖操縱子的CRP靶位點相似,說明在生理條件下,CRP可與NifA激活蛋白競爭該靶位點.該位點突變的體外凝膠阻滯實驗結果錶明,CRP不再與突變的nifU啟動子結閤.體內活性檢測結果顯示,在組成性錶達NifA蛋白的激活下,CRP對上遊CRP靶位點突變的nifU啟動子依然有抑製作用,其程度與野生型啟動子無明顯差異.因此,CRP對nifU啟動子的抑製作用不依賴于該啟動子上遊特異的CRP靶位點,暗示CRP與E?54RNA聚閤酶間的直接相互作用在該抑製效應中起著主要作用.
재대장간균중,탄대사총체조공단백CRP억제폐염극씨간균nifU계동자적표체.서렬분석표명,nifU계동자상유유일개CRP파위점,차해위점여이지적NifA파위점중합.체외응효조체실험결과표명,CRP대해위점적친화성여대유당조종자적CRP파위점상사,설명재생리조건하,CRP가여NifA격활단백경쟁해파위점.해위점돌변적체외응효조체실험결과표명,CRP불재여돌변적nifU계동자결합.체내활성검측결과현시,재조성성표체NifA단백적격활하,CRP대상유CRP파위점돌변적nifU계동자의연유억제작용,기정도여야생형계동자무명현차이.인차,CRP대nifU계동자적억제작용불의뢰우해계동자상유특이적CRP파위점,암시CRP여E?54RNA취합매간적직접상호작용재해억제효응중기착주요작용.