中国马铃薯
中國馬鈴藷
중국마령서
CHINESE POTATO
2002年
5期
259-262
,共4页
李广存%杨煜%王秀丽%高常勇%陈利容%毕玉平%王毅
李廣存%楊煜%王秀麗%高常勇%陳利容%畢玉平%王毅
리엄존%양욱%왕수려%고상용%진리용%필옥평%왕의
马铃薯X病毒%外壳蛋白基因%RT-PCR%序列分析
馬鈴藷X病毒%外殼蛋白基因%RT-PCR%序列分析
마령서X병독%외각단백기인%RT-PCR%서렬분석
将来源于国际马铃薯中心(International Potato Center,CIP)PVX病毒毒源接种至烟草上,对表现明显症状的烟草叶片提取马铃薯病毒X(PVX)总RNA,人工合成引物P1、P2,通过RT-PCR扩增合成PVX-cp的cDNA,井将其克隆到pGEM-T载体上.经限制酶谱分析后进行全序列测定,结果表明:该基因由714个核苷酸组成,编码238个氨基酸,与文献(分别来源于亚洲、非洲和欧洲)报道的4个pVX-cp基因相比同源性为81%～95%,其编码的氨基酸同源性均在90%以上.说明PVX-cp具有较高的保守性.用内切酶将PVX-cp基因自克隆载体pGEM切下,定向插入到表达质粒pBV220的启动子Pr、Pl的下游,构建了该基因的原核表达载体pBV-pyx,为进行该基因的原核表达和抗血清的制备奠定了基础.
將來源于國際馬鈴藷中心(International Potato Center,CIP)PVX病毒毒源接種至煙草上,對錶現明顯癥狀的煙草葉片提取馬鈴藷病毒X(PVX)總RNA,人工閤成引物P1、P2,通過RT-PCR擴增閤成PVX-cp的cDNA,井將其剋隆到pGEM-T載體上.經限製酶譜分析後進行全序列測定,結果錶明:該基因由714箇覈苷痠組成,編碼238箇氨基痠,與文獻(分彆來源于亞洲、非洲和歐洲)報道的4箇pVX-cp基因相比同源性為81%～95%,其編碼的氨基痠同源性均在90%以上.說明PVX-cp具有較高的保守性.用內切酶將PVX-cp基因自剋隆載體pGEM切下,定嚮插入到錶達質粒pBV220的啟動子Pr、Pl的下遊,構建瞭該基因的原覈錶達載體pBV-pyx,為進行該基因的原覈錶達和抗血清的製備奠定瞭基礎.
장래원우국제마령서중심(International Potato Center,CIP)PVX병독독원접충지연초상,대표현명현증상적연초협편제취마령서병독X(PVX)총RNA,인공합성인물P1、P2,통과RT-PCR확증합성PVX-cp적cDNA,정장기극륭도pGEM-T재체상.경한제매보분석후진행전서렬측정,결과표명:해기인유714개핵감산조성,편마238개안기산,여문헌(분별래원우아주、비주화구주)보도적4개pVX-cp기인상비동원성위81%～95%,기편마적안기산동원성균재90%이상.설명PVX-cp구유교고적보수성.용내절매장PVX-cp기인자극륭재체pGEM절하,정향삽입도표체질립pBV220적계동자Pr、Pl적하유,구건료해기인적원핵표체재체pBV-pyx,위진행해기인적원핵표체화항혈청적제비전정료기출.
