CAJ | 학술논문

在含10%小牛血清(NBS)的DMEM培养基中,分别各添加5%、10%、15%、20%和25%的二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PG)、乙二醇(EG)和甘油(G),对成年小鼠睾丸生殖细胞进行冷冻保存,复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率.结果显示,5%～25%DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为88.5%、88.0%、88.0%、65.6%及51.3%;5%～25%PG冻存液组的细胞复苏率分别为87.2%、86.4%、79.0%、73.4%及40.1%;5%～25%EG冻存液组的细胞复苏率分别为86.6%、80.9%、60.8%、51.3%及30.0%;5%～25%G冻存液组的细胞复苏率分别为86.5%、86.3%、65.3%、36.0%及31.4%.其中各抗冻剂5%和10%组的细胞复苏率最高,与15%组相比均存在显著或极显著差异.4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异.DMSO、PG、EG和G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞时的最小损失率分别为4.8%、6.1%、6.7%、6.8%.结果表明,采用慢速冷冻时,DMSO、PG、EG及G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂,最佳使用含量均为5%～10%.成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含5%～10%的DMSO、PG、EG和G的DMEM(含10%NBS)冻存液中,2步慢速降温,液氮储存,37℃水浴复苏,是一种具有较高复苏率的冷冻保存方法.
재함10%소우혈청(NBS)적DMEM배양기중,분별각첨가5%、10%、15%、20%화25%적이갑기아풍(DMSO)、병이순(PG)、을이순(EG)화감유(G),대성년소서고환생식세포진행냉동보존,복소후태반람염색측정세포복소솔.결과현시,5%～25%DMSO동존액조적세포복소솔분별위88.5%、88.0%、88.0%、65.6%급51.3%;5%～25%PG동존액조적세포복소솔분별위87.2%、86.4%、79.0%、73.4%급40.1%;5%～25%EG동존액조적세포복소솔분별위86.6%、80.9%、60.8%、51.3%급30.0%;5%～25%G동존액조적세포복소솔분별위86.5%、86.3%、65.3%、36.0%급31.4%.기중각항동제5%화10%조적세포복소솔최고,여15%조상비균존재현저혹겁현저차이.4충항동제적최고세포복소솔지간무현저차이.DMSO、PG、EG화G분별냉동보존성년소서고환생식세포시적최소손실솔분별위4.8%、6.1%、6.7%、6.8%.결과표명,채용만속냉동시,DMSO、PG、EG급G균괄의용작성년소서고환생식세포적항냉동제,최가사용함량균위5%～10%.성년소서고환생식세포분별재함5%～10%적DMSO、PG、EG화G적DMEM(함10%NBS)동존액중,2보만속강온,액담저존,37℃수욕복소,시일충구유교고복소솔적냉동보존방법.