免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2002年
3期
194-196，200
,共4页
黄丰%吴达龙%万永玲%袁志宏%李克勤%吴德政
黃豐%吳達龍%萬永玲%袁誌宏%李剋勤%吳德政
황봉%오체룡%만영령%원지굉%리극근%오덕정
人IL-18结合蛋白A%瞬时表达%COS-7细胞
人IL-18結閤蛋白A%瞬時錶達%COS-7細胞
인IL-18결합단백A%순시표체%COS-7세포
目的克隆人IL-18结合蛋白A(hIIL-18 BPa)的cDNA,观察其在COS-7中的表达.方法采用RT-PCR自人白血病细胞株jurkat中获得hIL-18 BPa的cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中.脂质体介导法将其转染C05-7细胞,72 h后收集上清纯化,用BCA法测定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法测定其活性.结果获得的IL-18 BPa的cDNA序列与gene bank登录的cDNA序列一致.上清液中hIL-18 BPa含量为1.4 mg/L,并具有良好的生物学活性.结论成功克隆hIL-18 BPa基因,并实现了在COS-7细胞中的瞬时表达,为研究其活性奠定了基础.
目的剋隆人IL-18結閤蛋白A(hIIL-18 BPa)的cDNA,觀察其在COS-7中的錶達.方法採用RT-PCR自人白血病細胞株jurkat中穫得hIL-18 BPa的cDNA,將其剋隆至T-vector中,經測序確證後,將該基因定嚮插入真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中.脂質體介導法將其轉染C05-7細胞,72 h後收集上清純化,用BCA法測定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法測定其活性.結果穫得的IL-18 BPa的cDNA序列與gene bank登錄的cDNA序列一緻.上清液中hIL-18 BPa含量為1.4 mg/L,併具有良好的生物學活性.結論成功剋隆hIL-18 BPa基因,併實現瞭在COS-7細胞中的瞬時錶達,為研究其活性奠定瞭基礎.
목적극륭인IL-18결합단백A(hIIL-18 BPa)적cDNA,관찰기재COS-7중적표체.방법채용RT-PCR자인백혈병세포주jurkat중획득hIL-18 BPa적cDNA,장기극륭지T-vector중,경측서학증후,장해기인정향삽입진핵표체재체pcDNA3.1(+)중.지질체개도법장기전염C05-7세포,72 h후수집상청순화,용BCA법측정hIL-18 BPa적함량,용ELISA법측정기활성.결과획득적IL-18 BPa적cDNA서렬여gene bank등록적cDNA서렬일치.상청액중hIL-18 BPa함량위1.4 mg/L,병구유량호적생물학활성.결론성공극륭hIL-18 BPa기인,병실현료재COS-7세포중적순시표체,위연구기활성전정료기출.
