上海免疫学杂志
上海免疫學雜誌
상해면역학잡지
SHANGHAI JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2002年
1期
26-29
,共4页
克隆%HLA-A2%生物素化序列%表达%纯化
剋隆%HLA-A2%生物素化序列%錶達%純化
극륭%HLA-A2%생물소화서렬%표체%순화
本文采用RT-PCR技术从人外周血PBMC中克隆HLA-A2基因的胞外区,拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列后,装入pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达.并对表达产物进行纯化与复性.结果成功地扩增出HLA-A2基因并测序证实;构建了融合表达载体pET-HLA-A2,并获表达与纯化.为研究在原核系统中表达、纯化与复性及进一步体外构建MHC-I类分子四聚体,探讨免疫识别机制奠定了基础.
本文採用RT-PCR技術從人外週血PBMC中剋隆HLA-A2基因的胞外區,拼接上依賴BirA酶的可生物素化序列後,裝入pET-42b(+)高效錶達載體進行誘導錶達.併對錶達產物進行純化與複性.結果成功地擴增齣HLA-A2基因併測序證實;構建瞭融閤錶達載體pET-HLA-A2,併穫錶達與純化.為研究在原覈繫統中錶達、純化與複性及進一步體外構建MHC-I類分子四聚體,探討免疫識彆機製奠定瞭基礎.
본문채용RT-PCR기술종인외주혈PBMC중극륭HLA-A2기인적포외구,병접상의뢰BirA매적가생물소화서렬후,장입pET-42b(+)고효표체재체진행유도표체.병대표체산물진행순화여복성.결과성공지확증출HLA-A2기인병측서증실;구건료융합표체재체pET-HLA-A2,병획표체여순화.위연구재원핵계통중표체、순화여복성급진일보체외구건MHC-I류분자사취체,탐토면역식별궤제전정료기출.
