科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2003年
22期
2343-2349
,共7页
缑仲轩%罗明芳%李信%邢建民%刘会洲
緱仲軒%囉明芳%李信%邢建民%劉會洲
구중헌%라명방%리신%형건민%류회주
二苯并噻吩%四硫途径%中间产物%基因序列%脱硫%红平红球菌
二苯併噻吩%四硫途徑%中間產物%基因序列%脫硫%紅平紅毬菌
이분병새분%사류도경%중간산물%기인서렬%탈류%홍평홍구균
红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)LSSE8-1是从我国贵州赤水气田中筛选分离的一株专一性脱硫菌.该菌能选择性地氧化二苯并噻吩(DBT)生成2-羟基联苯(HBP).利用DBTO2(dibenzothiophene5,5-dioxide)作底物既生成HBP又生成DBT,表明从DBT到DBTO2这一步反应在细胞水平是可逆的.同时以DBT为对照,0.01～0.4 mmol/L DBTO2均对细胞的生长表现出毒害作用,这就解释了脱硫反应中DBTO2不积累的问题.在溶菌酶处理的基础上,用碱液裂解法提取LSSE8-1质粒作模板,选择Rhodococcus erythropolis IGTS8脱硫基因的保守区设计引物,用PCR的方法扩增分别得到13,1.0和1.2 kb三段脱硫基因片段.选用pGEM-T easy载体,E.coli.DH5α为受体菌,克隆这三段基因后,测序结果表明这三段脱硫基因高度保守.与IGTS8的相关脱硫基因相比较,dszA和dszB的同源性都是100%,dszC的同源性是99%.
紅平紅毬菌(Rhodococcus erythropolis)LSSE8-1是從我國貴州赤水氣田中篩選分離的一株專一性脫硫菌.該菌能選擇性地氧化二苯併噻吩(DBT)生成2-羥基聯苯(HBP).利用DBTO2(dibenzothiophene5,5-dioxide)作底物既生成HBP又生成DBT,錶明從DBT到DBTO2這一步反應在細胞水平是可逆的.同時以DBT為對照,0.01～0.4 mmol/L DBTO2均對細胞的生長錶現齣毒害作用,這就解釋瞭脫硫反應中DBTO2不積纍的問題.在溶菌酶處理的基礎上,用堿液裂解法提取LSSE8-1質粒作模闆,選擇Rhodococcus erythropolis IGTS8脫硫基因的保守區設計引物,用PCR的方法擴增分彆得到13,1.0和1.2 kb三段脫硫基因片段.選用pGEM-T easy載體,E.coli.DH5α為受體菌,剋隆這三段基因後,測序結果錶明這三段脫硫基因高度保守.與IGTS8的相關脫硫基因相比較,dszA和dszB的同源性都是100%,dszC的同源性是99%.
홍평홍구균(Rhodococcus erythropolis)LSSE8-1시종아국귀주적수기전중사선분리적일주전일성탈류균.해균능선택성지양화이분병새분(DBT)생성2-간기련분(HBP).이용DBTO2(dibenzothiophene5,5-dioxide)작저물기생성HBP우생성DBT,표명종DBT도DBTO2저일보반응재세포수평시가역적.동시이DBT위대조,0.01～0.4 mmol/L DBTO2균대세포적생장표현출독해작용,저취해석료탈류반응중DBTO2불적루적문제.재용균매처리적기출상,용감액렬해법제취LSSE8-1질립작모판,선택Rhodococcus erythropolis IGTS8탈류기인적보수구설계인물,용PCR적방법확증분별득도13,1.0화1.2 kb삼단탈류기인편단.선용pGEM-T easy재체,E.coli.DH5α위수체균,극륭저삼단기인후,측서결과표명저삼단탈류기인고도보수.여IGTS8적상관탈류기인상비교,dszA화dszB적동원성도시100%,dszC적동원성시99%.
