动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2005年
7期
45-48,68
,共5页
杨健美%张小荣%高崧%韦栋平%刘秀梵
楊健美%張小榮%高崧%韋棟平%劉秀梵
양건미%장소영%고숭%위동평%류수범
平衡致死系统%基因敲除%蛋白表达
平衡緻死繫統%基因敲除%蛋白錶達
평형치사계통%기인고제%단백표체
利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550.经过质粒酶切分析和表达产物的SDS-PAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目的蛋白仍与谷胱甘肽转移酶相融合,得到有效表达,重组融合蛋白的分子质量约为80 ku.经体外连续传代试验,重组菌X4550(pFSFaeG)均能在无抗生素压力下大量扩增并稳定传代,质粒稳定性和蛋白表达稳定性良好.无抗性重组菌的成功构建解决了基因工程疫苗抗性基因潜在危险问题,并有望通过沙门氏菌载体的递送作用,为研制口服疫苗奠定了基础.
利用平衡緻死繫統成功地將構建錶達緻PWD和ED大腸桿菌保護性抗原基因的重組菌BL21(pFSFaeG)中所含氨芐抗性基因敲除,併轉化沙門氏菌宿主菌X4550.經過質粒酶切分析和錶達產物的SDS-PAGE證實,氨芐抗性基因已經成功敲除,併且目的蛋白仍與穀胱甘肽轉移酶相融閤,得到有效錶達,重組融閤蛋白的分子質量約為80 ku.經體外連續傳代試驗,重組菌X4550(pFSFaeG)均能在無抗生素壓力下大量擴增併穩定傳代,質粒穩定性和蛋白錶達穩定性良好.無抗性重組菌的成功構建解決瞭基因工程疫苗抗性基因潛在危險問題,併有望通過沙門氏菌載體的遞送作用,為研製口服疫苗奠定瞭基礎.
이용평형치사계통성공지장구건표체치PWD화ED대장간균보호성항원기인적중조균BL21(pFSFaeG)중소함안변항성기인고제,병전화사문씨균숙주균X4550.경과질립매절분석화표체산물적SDS-PAGE증실,안변항성기인이경성공고제,병차목적단백잉여곡광감태전이매상융합,득도유효표체,중조융합단백적분자질량약위80 ku.경체외련속전대시험,중조균X4550(pFSFaeG)균능재무항생소압력하대량확증병은정전대,질립은정성화단백표체은정성량호.무항성중조균적성공구건해결료기인공정역묘항성기인잠재위험문제,병유망통과사문씨균재체적체송작용,위연제구복역묘전정료기출.
