癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2006年
1期
9-11
,共3页
赖延东%吕嘉春%李秀英%宾晓农%吴建军
賴延東%呂嘉春%李秀英%賓曉農%吳建軍
뢰연동%려가춘%리수영%빈효농%오건군
hMGMT基因%RNA干扰%16HBE
hMGMT基因%RNA榦擾%16HBE
hMGMT기인%RNA간우%16HBE
背景与目的:构建能特异诱导人DNA修复基因hMGMT表达沉寂的RNA干扰载体.材料与方法:通过两步法聚合酶链反应(Polymerasing chain reaction,PCR)扩增hMGMT特异RNA干扰表达盒,连入质粒载体构建RNA干扰质粒pU6-MGMTi,与pGEFP-C1共转染人支气管上皮16HBE(Human bronchial epithelial)细胞,G418筛选后,采用RT-PCR和Western Blot分别检测mRNA和蛋白水平的表达抑制情况.结果:成功构建hMGMT特异RNA干扰质粒pU6-MGMTi,转染16HBE细胞的mRNA和蛋白表达受到显著的抑制.结论:应用RNA干扰表达盒以及共转染技术,构建MGMT基因表达沉寂的细胞株,为进一步阐明MGMT基因的功能创造条件.
揹景與目的:構建能特異誘導人DNA脩複基因hMGMT錶達沉寂的RNA榦擾載體.材料與方法:通過兩步法聚閤酶鏈反應(Polymerasing chain reaction,PCR)擴增hMGMT特異RNA榦擾錶達盒,連入質粒載體構建RNA榦擾質粒pU6-MGMTi,與pGEFP-C1共轉染人支氣管上皮16HBE(Human bronchial epithelial)細胞,G418篩選後,採用RT-PCR和Western Blot分彆檢測mRNA和蛋白水平的錶達抑製情況.結果:成功構建hMGMT特異RNA榦擾質粒pU6-MGMTi,轉染16HBE細胞的mRNA和蛋白錶達受到顯著的抑製.結論:應用RNA榦擾錶達盒以及共轉染技術,構建MGMT基因錶達沉寂的細胞株,為進一步闡明MGMT基因的功能創造條件.
배경여목적:구건능특이유도인DNA수복기인hMGMT표체침적적RNA간우재체.재료여방법:통과량보법취합매련반응(Polymerasing chain reaction,PCR)확증hMGMT특이RNA간우표체합,련입질립재체구건RNA간우질립pU6-MGMTi,여pGEFP-C1공전염인지기관상피16HBE(Human bronchial epithelial)세포,G418사선후,채용RT-PCR화Western Blot분별검측mRNA화단백수평적표체억제정황.결과:성공구건hMGMT특이RNA간우질립pU6-MGMTi,전염16HBE세포적mRNA화단백표체수도현저적억제.결론:응용RNA간우표체합이급공전염기술,구건MGMT기인표체침적적세포주,위진일보천명MGMT기인적공능창조조건.
