浙江大学学报（工学版）
浙江大學學報（工學版）
절강대학학보（공학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(ENGINEERING SCIENCE)
2007年
7期
1214-1218
,共5页
李红梅%梅乐和%URLACHER V B%SCHMID R D
李紅梅%梅樂和%URLACHER V B%SCHMID R D
리홍매%매악화%URLACHER V B%SCHMID R D
细胞色素P450 BM-3%饱和突变%羟基化吲哚%靛蓝
細胞色素P450 BM-3%飽和突變%羥基化吲哚%靛藍
세포색소P450 BM-3%포화돌변%간기화신타%전람
为了进一步获得具有更高活力的细胞色素P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q)突变酶,利用饱和突变技术对该突变酶的4个氨基酸位点D168、A225、K434、E435分别进行单一的随机突变,通过对其羟基化吲哚生成靛蓝的催化性能表征,发现P450 BM-3氨基酸残基的168、434和435位均位于蛋白功能区域,而225位则位于非功能区域,同时发现突变酶D168H具有更高的结合辅酶NADPH的能力,其消耗NADPH的能力几乎是亲本酶的8倍,但生成靛蓝的能力却只是亲本酶的3倍, 说明该位点极有可能承担了将电子从黄素单核苷酸(FMN)氧化还原酶区域传递到亚铁血红素区域的任务, 在P450 BM-3结构与功能的关系中扮演着重要的角色.
為瞭進一步穫得具有更高活力的細胞色素P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q)突變酶,利用飽和突變技術對該突變酶的4箇氨基痠位點D168、A225、K434、E435分彆進行單一的隨機突變,通過對其羥基化吲哚生成靛藍的催化性能錶徵,髮現P450 BM-3氨基痠殘基的168、434和435位均位于蛋白功能區域,而225位則位于非功能區域,同時髮現突變酶D168H具有更高的結閤輔酶NADPH的能力,其消耗NADPH的能力幾乎是親本酶的8倍,但生成靛藍的能力卻隻是親本酶的3倍, 說明該位點極有可能承擔瞭將電子從黃素單覈苷痠(FMN)氧化還原酶區域傳遞到亞鐵血紅素區域的任務, 在P450 BM-3結構與功能的關繫中扮縯著重要的角色.
위료진일보획득구유경고활력적세포색소P450 BM-3(F87V/A74G/L188Q)돌변매,이용포화돌변기술대해돌변매적4개안기산위점D168、A225、K434、E435분별진행단일적수궤돌변,통과대기간기화신타생성전람적최화성능표정,발현P450 BM-3안기산잔기적168、434화435위균위우단백공능구역,이225위칙위우비공능구역,동시발현돌변매D168H구유경고적결합보매NADPH적능력,기소모NADPH적능력궤호시친본매적8배,단생성전람적능력각지시친본매적3배, 설명해위점겁유가능승담료장전자종황소단핵감산(FMN)양화환원매구역전체도아철혈홍소구역적임무, 재P450 BM-3결구여공능적관계중분연착중요적각색.
