结直肠肛门外科
結直腸肛門外科
결직장항문외과
JOURNAL OF COLORECTAL & ANAL SURGERY
2009年
5期
311-314
,共4页
柳俊刚%高枫%张森%杨剑锋%刘传渊
柳俊剛%高楓%張森%楊劍鋒%劉傳淵
류준강%고풍%장삼%양검봉%류전연
枯否细胞%分离%鉴定%酶消化法
枯否細胞%分離%鑒定%酶消化法
고부세포%분리%감정%매소화법
目的 建立简便易行,存活好、产量和纯度高,稳定的枯否细胞(Kupffer Cell, KC)分离培养方法 .方法 根据酶消化时间不同和裂解红细胞的方法 在酶消化之后和之前分方法 Ⅰ和方法 Ⅱ.分别运用0.1%的Ⅱ型胶原酶、0.05%链酶蛋白酶E和0.005%DnaseⅠ在不同方法 中离体消化肝组织并进行密度梯度离心和贴壁培养提取KC,通过吞噬实验观察鉴定KC.结果 方法 Ⅰ和方法 Ⅱ中KC的数量分别是(0.71±0.21)×107/g和(0.96±0.20) ×107/g,细胞贴壁率分别40.1%、45.1%.用0.4%台盼蓝染色鉴定,存活率分别为90%、95%.吞噬实验发现,细胞纯度分别为90%、95%.结论 结合碾磨筛网滤过降低酶作用时间并在酶消化之前裂解红细胞分离提取枯否细胞具有存活好产量纯度高的优点.
目的 建立簡便易行,存活好、產量和純度高,穩定的枯否細胞(Kupffer Cell, KC)分離培養方法 .方法 根據酶消化時間不同和裂解紅細胞的方法 在酶消化之後和之前分方法 Ⅰ和方法 Ⅱ.分彆運用0.1%的Ⅱ型膠原酶、0.05%鏈酶蛋白酶E和0.005%DnaseⅠ在不同方法 中離體消化肝組織併進行密度梯度離心和貼壁培養提取KC,通過吞噬實驗觀察鑒定KC.結果 方法 Ⅰ和方法 Ⅱ中KC的數量分彆是(0.71±0.21)×107/g和(0.96±0.20) ×107/g,細胞貼壁率分彆40.1%、45.1%.用0.4%檯盼藍染色鑒定,存活率分彆為90%、95%.吞噬實驗髮現,細胞純度分彆為90%、95%.結論 結閤碾磨篩網濾過降低酶作用時間併在酶消化之前裂解紅細胞分離提取枯否細胞具有存活好產量純度高的優點.
목적 건립간편역행,존활호、산량화순도고,은정적고부세포(Kupffer Cell, KC)분리배양방법 .방법 근거매소화시간불동화렬해홍세포적방법 재매소화지후화지전분방법 Ⅰ화방법 Ⅱ.분별운용0.1%적Ⅱ형효원매、0.05%련매단백매E화0.005%DnaseⅠ재불동방법 중리체소화간조직병진행밀도제도리심화첩벽배양제취KC,통과탄서실험관찰감정KC.결과 방법 Ⅰ화방법 Ⅱ중KC적수량분별시(0.71±0.21)×107/g화(0.96±0.20) ×107/g,세포첩벽솔분별40.1%、45.1%.용0.4%태반람염색감정,존활솔분별위90%、95%.탄서실험발현,세포순도분별위90%、95%.결론 결합년마사망려과강저매작용시간병재매소화지전렬해홍세포분리제취고부세포구유존활호산량순도고적우점.
