中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
9期
1146-1150
,共5页
周四桂%袁茜%潘雪刁%金桂芳%徐立朋
週四桂%袁茜%潘雪刁%金桂芳%徐立朋
주사계%원천%반설조%금계방%서립붕
BAPTA-AM%ERK1/2%p38MAPK%巨噬细胞%RANKL%细胞分化
BAPTA-AM%ERK1/2%p38MAPK%巨噬細胞%RANKL%細胞分化
BAPTA-AM%ERK1/2%p38MAPK%거서세포%RANKL%세포분화
目的 探讨BAPTA-AM对RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞能力的影响以及其信号通路机制的研究.方法 体外分离培养小鼠骨髓巨噬细胞,建立RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞的实验模型.应用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测RANKL诱导的小鼠破骨细胞分化和存活的能力及BAPTA-AM对其的抑制作用;采用免疫印迹法(Western blot)测定ERK1/2和p38MAPK蛋白的磷酸化水平.结果 RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞胞质内可见多核,并能分化成为破骨细胞.不同浓度的BAPTA-AM(1、2 μmol·L-1)对破骨细胞的形成具有明显的抑制作用,且随着浓度增加能明显地降低TRAP阳性细胞数目.RANKL对小鼠骨髓巨噬细胞的ERK1/2和p38MAPK具有明显的激活作用,诱导胞质ERK1/2和p38MAPK磷酸化,而不同浓度的BAPTA-AM可明显地抑制这种磷酸化作用.结论 BAPTA-AM能明显地抑制RANKL诱导的小鼠骨髓巨噬细胞分化成破骨细胞,这种抑制作用可能是通过ERK1/2和p38MAPK信号蛋白介导.
目的 探討BAPTA-AM對RANKL誘導的小鼠骨髓巨噬細胞分化成破骨細胞能力的影響以及其信號通路機製的研究.方法 體外分離培養小鼠骨髓巨噬細胞,建立RANKL誘導的小鼠骨髓巨噬細胞分化成破骨細胞的實驗模型.應用抗酒石痠痠性燐痠酶(TRAP)染色法檢測RANKL誘導的小鼠破骨細胞分化和存活的能力及BAPTA-AM對其的抑製作用;採用免疫印跡法(Western blot)測定ERK1/2和p38MAPK蛋白的燐痠化水平.結果 RANKL誘導的小鼠骨髓巨噬細胞胞質內可見多覈,併能分化成為破骨細胞.不同濃度的BAPTA-AM(1、2 μmol·L-1)對破骨細胞的形成具有明顯的抑製作用,且隨著濃度增加能明顯地降低TRAP暘性細胞數目.RANKL對小鼠骨髓巨噬細胞的ERK1/2和p38MAPK具有明顯的激活作用,誘導胞質ERK1/2和p38MAPK燐痠化,而不同濃度的BAPTA-AM可明顯地抑製這種燐痠化作用.結論 BAPTA-AM能明顯地抑製RANKL誘導的小鼠骨髓巨噬細胞分化成破骨細胞,這種抑製作用可能是通過ERK1/2和p38MAPK信號蛋白介導.
목적 탐토BAPTA-AM대RANKL유도적소서골수거서세포분화성파골세포능력적영향이급기신호통로궤제적연구.방법 체외분리배양소서골수거서세포,건립RANKL유도적소서골수거서세포분화성파골세포적실험모형.응용항주석산산성린산매(TRAP)염색법검측RANKL유도적소서파골세포분화화존활적능력급BAPTA-AM대기적억제작용;채용면역인적법(Western blot)측정ERK1/2화p38MAPK단백적린산화수평.결과 RANKL유도적소서골수거서세포포질내가견다핵,병능분화성위파골세포.불동농도적BAPTA-AM(1、2 μmol·L-1)대파골세포적형성구유명현적억제작용,차수착농도증가능명현지강저TRAP양성세포수목.RANKL대소서골수거서세포적ERK1/2화p38MAPK구유명현적격활작용,유도포질ERK1/2화p38MAPK린산화,이불동농도적BAPTA-AM가명현지억제저충린산화작용.결론 BAPTA-AM능명현지억제RANKL유도적소서골수거서세포분화성파골세포,저충억제작용가능시통과ERK1/2화p38MAPK신호단백개도.
