金陵科技学院学报
金陵科技學院學報
금릉과기학원학보
JOURNAL OF JINLING INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2010年
4期
79-83
,共5页
张志成%陈琼%庞银芳%陆静静%戴薇%张大淦%陈钟鸣
張誌成%陳瓊%龐銀芳%陸靜靜%戴薇%張大淦%陳鐘鳴
장지성%진경%방은방%륙정정%대미%장대감%진종명
羊痘病毒%P32基因%克隆%序列分析
羊痘病毒%P32基因%剋隆%序列分析
양두병독%P32기인%극륭%서렬분석
根据GenBank中羊痘病毒基因(CPV)的核苷酸序列,设计了1对特异性检测引物.采用此引物检测来自于江苏丹阳的24份发病羊的皮肤痂皮.参考已发表的P32全基因的特异性引物,随机选择4份阳性DNA进行P32片段的扩增.将扩增产物纯化后连接pMD18-T载体,转化DH5a大肠埃希氏菌,选择阳性克隆送基因公司测序.应用DNAStar等分子生物学软件,对所测P32序列与GenBank中的国内外CPV毒株进行了同源性比较和遗传进化树分析.结果发现,24份疑似病料检测全是阳性;4个P32基因扩增产物均为1 023 bp,且样品间P32基因的核苷酸同源性为100%,与GenBank上已发表的的P32基因序列的相似性为97.7%～100%,且中国分离株在进化上属于同一分支.
根據GenBank中羊痘病毒基因(CPV)的覈苷痠序列,設計瞭1對特異性檢測引物.採用此引物檢測來自于江囌丹暘的24份髮病羊的皮膚痂皮.參攷已髮錶的P32全基因的特異性引物,隨機選擇4份暘性DNA進行P32片段的擴增.將擴增產物純化後連接pMD18-T載體,轉化DH5a大腸埃希氏菌,選擇暘性剋隆送基因公司測序.應用DNAStar等分子生物學軟件,對所測P32序列與GenBank中的國內外CPV毒株進行瞭同源性比較和遺傳進化樹分析.結果髮現,24份疑似病料檢測全是暘性;4箇P32基因擴增產物均為1 023 bp,且樣品間P32基因的覈苷痠同源性為100%,與GenBank上已髮錶的的P32基因序列的相似性為97.7%～100%,且中國分離株在進化上屬于同一分支.
근거GenBank중양두병독기인(CPV)적핵감산서렬,설계료1대특이성검측인물.채용차인물검측래자우강소단양적24빈발병양적피부가피.삼고이발표적P32전기인적특이성인물,수궤선택4빈양성DNA진행P32편단적확증.장확증산물순화후련접pMD18-T재체,전화DH5a대장애희씨균,선택양성극륭송기인공사측서.응용DNAStar등분자생물학연건,대소측P32서렬여GenBank중적국내외CPV독주진행료동원성비교화유전진화수분석.결과발현,24빈의사병료검측전시양성;4개P32기인확증산물균위1 023 bp,차양품간P32기인적핵감산동원성위100%,여GenBank상이발표적적P32기인서렬적상사성위97.7%～100%,차중국분리주재진화상속우동일분지.
