福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
6期
614-617
,共4页
杨振慧%葛均青%刘荭%杨金先%郑晓聪%林天龙
楊振慧%葛均青%劉葒%楊金先%鄭曉聰%林天龍
양진혜%갈균청%류홍%양금선%정효총%림천룡
鲤春病毒血症病毒%基质蛋白基因%原核表达%多克隆抗体
鯉春病毒血癥病毒%基質蛋白基因%原覈錶達%多剋隆抗體
리춘병독혈증병독%기질단백기인%원핵표체%다극륭항체
根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)基因组序列(GenBank:NC_002803),人工合成M基因开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化工程菌株BL21 (DE3),在0.1 mmol·L-1 IPTG、37℃下诱导5h,获得高效表达的M蛋白,但其主要以包涵体的形式存在,经超声破碎、包涵体纯化后,再经Ni亲和层析柱纯化,获得高纯度的M蛋白.以纯化的M蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备了M蛋白的多克隆抗血清.EHSA检测显示抗血清的效价达1∶128000；western blot分析显示抗血清能够识别SVCV的M蛋白,表明其具有较好的灵敏性和特异性.
根據鯉春病毒血癥病毒(SVCV)基因組序列(GenBank:NC_002803),人工閤成M基因開放閱讀框序列,剋隆至原覈錶達載體pET-32a(+),轉化工程菌株BL21 (DE3),在0.1 mmol·L-1 IPTG、37℃下誘導5h,穫得高效錶達的M蛋白,但其主要以包涵體的形式存在,經超聲破碎、包涵體純化後,再經Ni親和層析柱純化,穫得高純度的M蛋白.以純化的M蛋白為抗原免疫新西蘭大白兔,製備瞭M蛋白的多剋隆抗血清.EHSA檢測顯示抗血清的效價達1∶128000；western blot分析顯示抗血清能夠識彆SVCV的M蛋白,錶明其具有較好的靈敏性和特異性.
근거리춘병독혈증병독(SVCV)기인조서렬(GenBank:NC_002803),인공합성M기인개방열독광서렬,극륭지원핵표체재체pET-32a(+),전화공정균주BL21 (DE3),재0.1 mmol·L-1 IPTG、37℃하유도5h,획득고효표체적M단백,단기주요이포함체적형식존재,경초성파쇄、포함체순화후,재경Ni친화층석주순화,획득고순도적M단백.이순화적M단백위항원면역신서란대백토,제비료M단백적다극륭항혈청.EHSA검측현시항혈청적효개체1∶128000；western blot분석현시항혈청능구식별SVCV적M단백,표명기구유교호적령민성화특이성.
