浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2012年
2期
153-158
,共6页
冯永%乔木%卢宇婷%蒋亚建%王娜%朱丽君
馮永%喬木%盧宇婷%蔣亞建%王娜%硃麗君
풍영%교목%로우정%장아건%왕나%주려군
蛋白激酶C%蛋白质构象%蛋白质类/化学%受体,谷氨酸/代谢%计算机模拟%PICK1%PDZ结构域%GluR2亚基%定点突变
蛋白激酶C%蛋白質構象%蛋白質類/化學%受體,穀氨痠/代謝%計算機模擬%PICK1%PDZ結構域%GluR2亞基%定點突變
단백격매C%단백질구상%단백질류/화학%수체,곡안산/대사%계산궤모의%PICK1%PDZ결구역%GluR2아기%정점돌변
目的:研究PICK1 (protein interacting with C kinase 1)蛋白PDZ结构域内83位点赖氨酸( K83)对PICK1和AMPA受体GluR2亚单位相互作用的影响.方法:利用计算机对PICK1 PDZ结构域和GluR2 C末端4个氨基酸残基进行对接模拟,然后将K83进行虚拟点突变,计算并观察突变后结构和键能的改变.利用实验室已有的野生型全长PICK1 cDNA质粒为模板,构建点突变质粒,与野生型GluR2共转到HEK293T细胞,观察两者在细胞内定位和分布的改变.结果:当野生型PICK1与GluR2共转染时,HEK293T细胞有大量PICK1和GluR2共定位的集簇(cluster).当我们把构建的PICK1突变体与GluR2共转染时,不同的突变体表现出不一样的改变.结论:改变K83位点的氨基酸结构,很可能会改变PICK1 PDZ结构域与GluR2 C末端结合所形成的疏水、氢键、静电相互作用,使得PDZ结构域与GluR2 C末端的结合能力发生不同程度的改变.
目的:研究PICK1 (protein interacting with C kinase 1)蛋白PDZ結構域內83位點賴氨痠( K83)對PICK1和AMPA受體GluR2亞單位相互作用的影響.方法:利用計算機對PICK1 PDZ結構域和GluR2 C末耑4箇氨基痠殘基進行對接模擬,然後將K83進行虛擬點突變,計算併觀察突變後結構和鍵能的改變.利用實驗室已有的野生型全長PICK1 cDNA質粒為模闆,構建點突變質粒,與野生型GluR2共轉到HEK293T細胞,觀察兩者在細胞內定位和分佈的改變.結果:噹野生型PICK1與GluR2共轉染時,HEK293T細胞有大量PICK1和GluR2共定位的集簇(cluster).噹我們把構建的PICK1突變體與GluR2共轉染時,不同的突變體錶現齣不一樣的改變.結論:改變K83位點的氨基痠結構,很可能會改變PICK1 PDZ結構域與GluR2 C末耑結閤所形成的疏水、氫鍵、靜電相互作用,使得PDZ結構域與GluR2 C末耑的結閤能力髮生不同程度的改變.
목적:연구PICK1 (protein interacting with C kinase 1)단백PDZ결구역내83위점뢰안산( K83)대PICK1화AMPA수체GluR2아단위상호작용적영향.방법:이용계산궤대PICK1 PDZ결구역화GluR2 C말단4개안기산잔기진행대접모의,연후장K83진행허의점돌변,계산병관찰돌변후결구화건능적개변.이용실험실이유적야생형전장PICK1 cDNA질립위모판,구건점돌변질립,여야생형GluR2공전도HEK293T세포,관찰량자재세포내정위화분포적개변.결과:당야생형PICK1여GluR2공전염시,HEK293T세포유대량PICK1화GluR2공정위적집족(cluster).당아문파구건적PICK1돌변체여GluR2공전염시,불동적돌변체표현출불일양적개변.결론:개변K83위점적안기산결구,흔가능회개변PICK1 PDZ결구역여GluR2 C말단결합소형성적소수、경건、정전상호작용,사득PDZ결구역여GluR2 C말단적결합능력발생불동정도적개변.