草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2012年
4期
747-752
,共6页
李蔚%张娜%李仁%赵冰%郭仰东
李蔚%張娜%李仁%趙冰%郭仰東
리위%장나%리인%조빙%곽앙동
多年生黑麦草%胚性愈伤组织%植株再生%磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因%遗传转化
多年生黑麥草%胚性愈傷組織%植株再生%燐痠烯醇式丙酮痠羧化酶(PEPC)基因%遺傳轉化
다년생흑맥초%배성유상조직%식주재생%린산희순식병동산최화매(PEPC)기인%유전전화
以多年生黑麦草(Lolium perenne L.)成熟种子作为外植体,建立其高频再生体系,通过农杆菌介导法将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因转入,为多年生黑麦草的抗逆转基因工作奠定基础.结果表明:种子充分灭菌后在附加6.0 mg· L-1 2,4-D的培养基中诱导愈伤组织,诱导率可达61.33%.愈伤组织在2,4-D浓度减半的培养基上继代培养长势良好,分化培养基为MS培养基附加1.0mg· L-16-BA,分化率最高达到61.33%,在1/2 MS+0.5 mg· L-1 NAA培养基中进行生根培养,生根率达100%.以该再生体系为基础,将获得的愈伤组织作为外植体进行遗传转化,经筛选培养后得到再生植株,通过PCR及实时荧光定量(Real-Time)PCR验证表明PEPC基因已成功转入,转化率为8.67%.试验结果将为多年生黑麦草抗性品种的研究奠定基础.
以多年生黑麥草(Lolium perenne L.)成熟種子作為外植體,建立其高頻再生體繫,通過農桿菌介導法將燐痠烯醇式丙酮痠羧化酶(PEPC)基因轉入,為多年生黑麥草的抗逆轉基因工作奠定基礎.結果錶明:種子充分滅菌後在附加6.0 mg· L-1 2,4-D的培養基中誘導愈傷組織,誘導率可達61.33%.愈傷組織在2,4-D濃度減半的培養基上繼代培養長勢良好,分化培養基為MS培養基附加1.0mg· L-16-BA,分化率最高達到61.33%,在1/2 MS+0.5 mg· L-1 NAA培養基中進行生根培養,生根率達100%.以該再生體繫為基礎,將穫得的愈傷組織作為外植體進行遺傳轉化,經篩選培養後得到再生植株,通過PCR及實時熒光定量(Real-Time)PCR驗證錶明PEPC基因已成功轉入,轉化率為8.67%.試驗結果將為多年生黑麥草抗性品種的研究奠定基礎.
이다년생흑맥초(Lolium perenne L.)성숙충자작위외식체,건립기고빈재생체계,통과농간균개도법장린산희순식병동산최화매(PEPC)기인전입,위다년생흑맥초적항역전기인공작전정기출.결과표명:충자충분멸균후재부가6.0 mg· L-1 2,4-D적배양기중유도유상조직,유도솔가체61.33%.유상조직재2,4-D농도감반적배양기상계대배양장세량호,분화배양기위MS배양기부가1.0mg· L-16-BA,분화솔최고체도61.33%,재1/2 MS+0.5 mg· L-1 NAA배양기중진행생근배양,생근솔체100%.이해재생체계위기출,장획득적유상조직작위외식체진행유전전화,경사선배양후득도재생식주,통과PCR급실시형광정량(Real-Time)PCR험증표명PEPC기인이성공전입,전화솔위8.67%.시험결과장위다년생흑맥초항성품충적연구전정기출.