江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2012年
3期
546-549
,共4页
高致病性%猪繁殖与呼吸综合征病毒%Nsp2基因%原核表达
高緻病性%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%Nsp2基因%原覈錶達
고치병성%저번식여호흡종합정병독%Nsp2기인%원핵표체
通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV) Nsp2基因进行克隆表达以获得蛋白,为该病的诊断预防奠定基础.采用自行设计的引物对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒进行RT-PCR扩增,将产物基因回收纯化测序后构建PGEX-6P- 1-Nsp2原核表达载体,用BL21(DE3)细胞进行转化,挑选阳性菌,用IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE电泳和Western-Blot对表达产物进行鉴定.获得了HPPRRSV Nsp2基因序列,成功构建了PGEX-6P- 1-Nsp2原核表达载体,经37℃,4h获得表达产物,将表达产物进行SDS-PAGE和Western-Blot 分析,获得了一条约42 ku浓缩蛋白带.本实验的克隆表达产物为高致病性蓝耳病病毒Nsp2目的蛋白.
通過對高緻病性豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(HPPRRSV) Nsp2基因進行剋隆錶達以穫得蛋白,為該病的診斷預防奠定基礎.採用自行設計的引物對高緻病性豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒進行RT-PCR擴增,將產物基因迴收純化測序後構建PGEX-6P- 1-Nsp2原覈錶達載體,用BL21(DE3)細胞進行轉化,挑選暘性菌,用IPTG誘導錶達,採用SDS-PAGE電泳和Western-Blot對錶達產物進行鑒定.穫得瞭HPPRRSV Nsp2基因序列,成功構建瞭PGEX-6P- 1-Nsp2原覈錶達載體,經37℃,4h穫得錶達產物,將錶達產物進行SDS-PAGE和Western-Blot 分析,穫得瞭一條約42 ku濃縮蛋白帶.本實驗的剋隆錶達產物為高緻病性藍耳病病毒Nsp2目的蛋白.
통과대고치병성저번식여호흡종합정병독(HPPRRSV) Nsp2기인진행극륭표체이획득단백,위해병적진단예방전정기출.채용자행설계적인물대고치병성저번식여호흡종합정병독진행RT-PCR확증,장산물기인회수순화측서후구건PGEX-6P- 1-Nsp2원핵표체재체,용BL21(DE3)세포진행전화,도선양성균,용IPTG유도표체,채용SDS-PAGE전영화Western-Blot대표체산물진행감정.획득료HPPRRSV Nsp2기인서렬,성공구건료PGEX-6P- 1-Nsp2원핵표체재체,경37℃,4h획득표체산물,장표체산물진행SDS-PAGE화Western-Blot 분석,획득료일조약42 ku농축단백대.본실험적극륭표체산물위고치병성람이병병독Nsp2목적단백.
