生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
6期
911-915
,共5页
苏移山%王圣钧%王鹏%祁庆生
囌移山%王聖鈞%王鵬%祁慶生
소이산%왕골균%왕붕%기경생
N-糖酰胺酶F%PET28a%RNase B%脱糖基化
N-糖酰胺酶F%PET28a%RNase B%脫糖基化
N-당선알매F%PET28a%RNase B%탈당기화
从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).重组大肠杆菌经诱导表达和纯化提取后,获取大量高纯度N-糖酰胺酶F,其纯度达90%以上.试验证明,经纯化的重组N-糖酰胺酶F可以切除核糖核酸酶B、转铁蛋白和人IgG等糖蛋白上的N-糖链,具有脱糖基化作用.
從腦膜炎膿桿菌(Flavobacterium meningosepticum)基因組中通過PCR擴增瞭N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,經酶切後與錶達載體pET28a連接,穫得的重組質粒轉入大腸桿菌BL21(DE3).重組大腸桿菌經誘導錶達和純化提取後,穫取大量高純度N-糖酰胺酶F,其純度達90%以上.試驗證明,經純化的重組N-糖酰胺酶F可以切除覈糖覈痠酶B、轉鐵蛋白和人IgG等糖蛋白上的N-糖鏈,具有脫糖基化作用.
종뇌막염농간균(Flavobacterium meningosepticum)기인조중통과PCR확증료N-당선알매F(PNGase F)기인,경매절후여표체재체pET28a련접,획득적중조질립전입대장간균BL21(DE3).중조대장간균경유도표체화순화제취후,획취대량고순도N-당선알매F,기순도체90%이상.시험증명,경순화적중조N-당선알매F가이절제핵당핵산매B、전철단백화인IgG등당단백상적N-당련,구유탈당기화작용.
