法医学杂志
法醫學雜誌
법의학잡지
JOURNAL OF FORENSIC MEDICINE
2008年
3期
185-188,193
,共5页
骆宏%陆惠玲%周新晨%章雅清%姚亚楠
駱宏%陸惠玲%週新晨%章雅清%姚亞楠
락굉%륙혜령%주신신%장아청%요아남
法医物证学%种属鉴定%12S rRNA基因%生物检材
法醫物證學%種屬鑒定%12S rRNA基因%生物檢材
법의물증학%충속감정%12S rRNA기인%생물검재
目的 建立一种能够在同一反应条件下鉴定多个具体物种,又满足简单、快速、特异、灵敏、准确等实用要求的种属鉴定方法.方法 从GenBank中获取人、鸡、鸭、鹅、猪、兔、鼠、绵羊、水牛、狗、山羊等11个物种的12S rRNA基因序列,设计一对针对上述11个物种的通用引物和分别针对人、鸡和鸭的特异引物,同时扩增各物种12S rRNA基因.以通用引物扩增片段为内部对照,以特异引物扩增片段用于人、鸡和鸭的种属鉴定,并分别对人、鸡、鸭单一检材以及人和鸡、人和鸭、鸡和鸭等二元混合DNA进行鉴定.结果 通用引物扩增,各物种均有400bp左右的扩增片段;特异引物只对各自目标种属有扩增产物,片段大小:人163bp、鸡286bp、鸭374bp;测序结果与GenBank既有序列比对,Identities分值:人100%、鸡99%、鸭100%;通用引物扩增人、鸡和鸭检材的灵敏度为2.5pg;特异引物扩增灵敏度人为2.5pg,鸡、鸭均为200pg;混合DNA中任一种DNA的含量只要高于检测灵敏度即可被准确检出,不受另一种DNA量的干扰;盲测结果准确.结论 本方法可以利用同一种PCR反应条件鉴定多个物种的种属.
目的 建立一種能夠在同一反應條件下鑒定多箇具體物種,又滿足簡單、快速、特異、靈敏、準確等實用要求的種屬鑒定方法.方法 從GenBank中穫取人、鷄、鴨、鵝、豬、兔、鼠、綿羊、水牛、狗、山羊等11箇物種的12S rRNA基因序列,設計一對針對上述11箇物種的通用引物和分彆針對人、鷄和鴨的特異引物,同時擴增各物種12S rRNA基因.以通用引物擴增片段為內部對照,以特異引物擴增片段用于人、鷄和鴨的種屬鑒定,併分彆對人、鷄、鴨單一檢材以及人和鷄、人和鴨、鷄和鴨等二元混閤DNA進行鑒定.結果 通用引物擴增,各物種均有400bp左右的擴增片段;特異引物隻對各自目標種屬有擴增產物,片段大小:人163bp、鷄286bp、鴨374bp;測序結果與GenBank既有序列比對,Identities分值:人100%、鷄99%、鴨100%;通用引物擴增人、鷄和鴨檢材的靈敏度為2.5pg;特異引物擴增靈敏度人為2.5pg,鷄、鴨均為200pg;混閤DNA中任一種DNA的含量隻要高于檢測靈敏度即可被準確檢齣,不受另一種DNA量的榦擾;盲測結果準確.結論 本方法可以利用同一種PCR反應條件鑒定多箇物種的種屬.
목적 건립일충능구재동일반응조건하감정다개구체물충,우만족간단、쾌속、특이、령민、준학등실용요구적충속감정방법.방법 종GenBank중획취인、계、압、아、저、토、서、면양、수우、구、산양등11개물충적12S rRNA기인서렬,설계일대침대상술11개물충적통용인물화분별침대인、계화압적특이인물,동시확증각물충12S rRNA기인.이통용인물확증편단위내부대조,이특이인물확증편단용우인、계화압적충속감정,병분별대인、계、압단일검재이급인화계、인화압、계화압등이원혼합DNA진행감정.결과 통용인물확증,각물충균유400bp좌우적확증편단;특이인물지대각자목표충속유확증산물,편단대소:인163bp、계286bp、압374bp;측서결과여GenBank기유서렬비대,Identities분치:인100%、계99%、압100%;통용인물확증인、계화압검재적령민도위2.5pg;특이인물확증령민도인위2.5pg,계、압균위200pg;혼합DNA중임일충DNA적함량지요고우검측령민도즉가피준학검출,불수령일충DNA량적간우;맹측결과준학.결론 본방법가이이용동일충PCR반응조건감정다개물충적충속.
