安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
19期
8055-8056,8094
,共3页
王沛%刘瑞娟%沈裕虎%张波%王建武%王海庆
王沛%劉瑞娟%瀋裕虎%張波%王建武%王海慶
왕패%류서연%침유호%장파%왕건무%왕해경
锌指蛋白%拟南芥%细胞定位
鋅指蛋白%擬南芥%細胞定位
자지단백%의남개%세포정위
[目的]确定拟南芥锌指蛋白基因Atfin1的效应部位.[方法]用Trizol提取拟南芥叶片的总RNA,根据GeneBank数据库中Atfin1 cDNA全序列设计引物,进行Atfin1的PCR扩增,克隆Atfin1基因,并进行同源性比较,构建pBI-Affin1-EGFP融合表达载体,对Atfin1进行定位.[结果]克隆得到的拟南芥Atfin1蛋白氨基酸序列同紫花苜蓿Atfin1蛋白氨基酸序列的同源性达78.60%,在接近C-末端区域形??锌指结构的8个氨基酸残基高度保守,与周围的氨基酸残基共同形成典型的C4HC3基序.融合有Atfin1的绿色荧光蛋白只在细胞核区域表达,而未做融合的绿色荧光蛋白在整个细胞内呈弥散状分布.Atfin1没有典型的核定位信号,但仍然能够准确地在细胞核内表达.[结论]Atfin1在细胞核内表达,符合作为转录因子的表达特征.
[目的]確定擬南芥鋅指蛋白基因Atfin1的效應部位.[方法]用Trizol提取擬南芥葉片的總RNA,根據GeneBank數據庫中Atfin1 cDNA全序列設計引物,進行Atfin1的PCR擴增,剋隆Atfin1基因,併進行同源性比較,構建pBI-Affin1-EGFP融閤錶達載體,對Atfin1進行定位.[結果]剋隆得到的擬南芥Atfin1蛋白氨基痠序列同紫花苜蓿Atfin1蛋白氨基痠序列的同源性達78.60%,在接近C-末耑區域形??鋅指結構的8箇氨基痠殘基高度保守,與週圍的氨基痠殘基共同形成典型的C4HC3基序.融閤有Atfin1的綠色熒光蛋白隻在細胞覈區域錶達,而未做融閤的綠色熒光蛋白在整箇細胞內呈瀰散狀分佈.Atfin1沒有典型的覈定位信號,但仍然能夠準確地在細胞覈內錶達.[結論]Atfin1在細胞覈內錶達,符閤作為轉錄因子的錶達特徵.
[목적]학정의남개자지단백기인Atfin1적효응부위.[방법]용Trizol제취의남개협편적총RNA,근거GeneBank수거고중Atfin1 cDNA전서렬설계인물,진행Atfin1적PCR확증,극륭Atfin1기인,병진행동원성비교,구건pBI-Affin1-EGFP융합표체재체,대Atfin1진행정위.[결과]극륭득도적의남개Atfin1단백안기산서렬동자화목숙Atfin1단백안기산서렬적동원성체78.60%,재접근C-말단구역형??자지결구적8개안기산잔기고도보수,여주위적안기산잔기공동형성전형적C4HC3기서.융합유Atfin1적록색형광단백지재세포핵구역표체,이미주융합적록색형광단백재정개세포내정미산상분포.Atfin1몰유전형적핵정위신호,단잉연능구준학지재세포핵내표체.[결론]Atfin1재세포핵내표체,부합작위전록인자적표체특정.
