靶向Notchl基因siRNA真核表达载体的构建与鉴定
파향Notchl기인siRNA진핵표체재체적구건여감정
The construction and identification of siRNA eukaryotic expression vector targeting Notch1 gene
  • 万方数据
    临床泌尿外科杂志 림상비뇨외과잡지
    JOURNAL OF CLINICAL UROLOGY
    2008年 5期 391-394 ,共4页

    艾星%居正华%吴准%史涛平%王保军%徐华%刘双林%吴正启%胡建庭%周辉霞%张旭

    애성%거정화%오준%사도평%왕보군%서화%류쌍림%오정계%호건정%주휘하%장욱

    Notchl%小分子干扰RNA%真核表达载体 Notchl%小分子榦擾RNA%真覈錶達載體
    Notchl%소분자간우RNA%진핵표체재체
    目的:构建并鉴定靶向Notchl基因的siRNA真核表达载体.方法:根据Notchl基因cDNA序列,设计靶向目的基因的3个siRNA靶序列,将其插入U6启动子下游,克隆到真核表达载体pGsensil中,并进行酶切鉴定和DNA测序鉴定.采用脂质体介导法将构建好的3个siRNA表达载体分别转染T24人膀胱癌细胞中,荧光下观测转染效率.RT-PCR检测Notchl基因mRNA在转染前后的表达.结果:转染48 h后3个siRNA表达载体均不同程度的抑制了Notchl mRNA的表达.酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确.结论:成功构建的靶向Notchl的siRNA真核表达载体,具有抑制Notchl基因mRNA表达的功能,可能为膀胱癌基因治疗研究提供一个新的方向.
    목적:구건병감정파향Notchl기인적siRNA진핵표체재체.방법:근거Notchl기인cDNA서렬,설계파향목적기인적3개siRNA파서렬,장기삽입U6계동자하유,극륭도진핵표체재체pGsensil중,병진행매절감정화DNA측서감정.채용지질체개도법장구건호적3개siRNA표체재체분별전염T24인방광암세포중,형광하관측전염효솔.RT-PCR검측Notchl기인mRNA재전염전후적표체.결과:전염48 h후3개siRNA표체재체균불동정도적억제료Notchl mRNA적표체.매절감정급DNA측서결과현시삽입편단정학.결론:성공구건적파향Notchl적siRNA진핵표체재체,구유억제Notchl기인mRNA표체적공능,가능위방광암기인치료연구제공일개신적방향.
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