胃肠病学
胃腸病學
위장병학
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
2009年
5期
274-278
,共5页
申玉翠%靖大道%叶赛%王弢%张庆华
申玉翠%靖大道%葉賽%王弢%張慶華
신옥취%정대도%협새%왕도%장경화
胃肿瘤%羟前列腺素脱氢酶类%转染%细胞增殖%细胞迁移
胃腫瘤%羥前列腺素脫氫酶類%轉染%細胞增殖%細胞遷移
위종류%간전렬선소탈경매류%전염%세포증식%세포천이
前期研究表明胃癌组织中NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)表达明显减低,瞬时转染15-PGDH对人胃癌细胞的生长和迁移有一定抑制作用.目的:建立稳定转染15-PGDH基因的人胃癌细胞株SGC7901,观察恢复15-PGDH表达对胃癌细胞生长和迁移的影响,探讨15-PGDH与胃癌发生、发展的关系.方法:以双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒pcDNA3/15-PGDH,采用脂质体法将质粒转染入SGC7901细胞,G418筛选稳定转染株,实时聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法鉴定.分别以甲基噻唑基四唑(MTT)实验和细胞划痕实验检测稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株的增殖情况和迁移能力.结果:经4周G418筛选以及实时PCR和蛋白质印迹法鉴定,得到4株可稳定、较高水平表达15-PGDH的SGC7901细胞株.稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株,细胞生长和迁移能力显著低于空质粒组(P<0.01).结论:成功建立了稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株,恢复15-PGDH表达可显著抑制人胃癌细胞的生长和迁移.15-PGDH表达减低或缺失与胃癌的发生、发展密切相关.
前期研究錶明胃癌組織中NAD+依賴性15-羥基前列腺素脫氫酶(15-PGDH)錶達明顯減低,瞬時轉染15-PGDH對人胃癌細胞的生長和遷移有一定抑製作用.目的:建立穩定轉染15-PGDH基因的人胃癌細胞株SGC7901,觀察恢複15-PGDH錶達對胃癌細胞生長和遷移的影響,探討15-PGDH與胃癌髮生、髮展的關繫.方法:以雙酶切和質粒測序鑒定真覈錶達質粒pcDNA3/15-PGDH,採用脂質體法將質粒轉染入SGC7901細胞,G418篩選穩定轉染株,實時聚閤酶鏈反應(PCR)和蛋白質印跡法鑒定.分彆以甲基噻唑基四唑(MTT)實驗和細胞劃痕實驗檢測穩定轉染15-PGDH基因的SGC7901細胞株的增殖情況和遷移能力.結果:經4週G418篩選以及實時PCR和蛋白質印跡法鑒定,得到4株可穩定、較高水平錶達15-PGDH的SGC7901細胞株.穩定轉染15-PGDH基因的SGC7901細胞株,細胞生長和遷移能力顯著低于空質粒組(P<0.01).結論:成功建立瞭穩定轉染15-PGDH基因的SGC7901細胞株,恢複15-PGDH錶達可顯著抑製人胃癌細胞的生長和遷移.15-PGDH錶達減低或缺失與胃癌的髮生、髮展密切相關.
전기연구표명위암조직중NAD+의뢰성15-간기전렬선소탈경매(15-PGDH)표체명현감저,순시전염15-PGDH대인위암세포적생장화천이유일정억제작용.목적:건립은정전염15-PGDH기인적인위암세포주SGC7901,관찰회복15-PGDH표체대위암세포생장화천이적영향,탐토15-PGDH여위암발생、발전적관계.방법:이쌍매절화질립측서감정진핵표체질립pcDNA3/15-PGDH,채용지질체법장질립전염입SGC7901세포,G418사선은정전염주,실시취합매련반응(PCR)화단백질인적법감정.분별이갑기새서기사서(MTT)실험화세포화흔실험검측은정전염15-PGDH기인적SGC7901세포주적증식정황화천이능력.결과:경4주G418사선이급실시PCR화단백질인적법감정,득도4주가은정、교고수평표체15-PGDH적SGC7901세포주.은정전염15-PGDH기인적SGC7901세포주,세포생장화천이능력현저저우공질립조(P<0.01).결론:성공건립료은정전염15-PGDH기인적SGC7901세포주,회복15-PGDH표체가현저억제인위암세포적생장화천이.15-PGDH표체감저혹결실여위암적발생、발전밀절상관.