中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2010年
10期
907-911
,共5页
陈婉南%刘玲玲%吴云丽%焦伯延%林万松%林旭
陳婉南%劉玲玲%吳雲麗%焦伯延%林萬鬆%林旭
진완남%류령령%오운려%초백연%림만송%림욱
乙型肝炎病毒%表面抗原中蛋白%酵母双杂交
乙型肝炎病毒%錶麵抗原中蛋白%酵母雙雜交
을형간염병독%표면항원중단백%효모쌍잡교
目的 筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)相互作用的肝细胞蛋白.方法 PCR扩增MHBs编码基因并将S区起始密码子突变,获得目的 基因MHBs-mut,克隆于诱饵载体pGBKT7.在证实MHBs-mut蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛查与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白,并在酵母细胞内验证蛋白的相互作用.结果 构建酵母双杂交诱饵载体,获得重组质粒pGBKT7- MHBs-mut.Western blot显示其在酵母中表达MHBs-mut蛋白.酵母双杂交筛选并验证,得到与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白:COP9信号体第五个亚单位(COPS5,又名C- Jun结合蛋白 1,c-Jun-activation-domain binding protein 1, JAB1).结论 乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白与COPS5在酵母AH109细胞中具有相互作用.
目的 篩選與乙型肝炎病毒錶麵抗原中蛋白(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)相互作用的肝細胞蛋白.方法 PCR擴增MHBs編碼基因併將S區起始密碼子突變,穫得目的 基因MHBs-mut,剋隆于誘餌載體pGBKT7.在證實MHBs-mut蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母雙雜交繫統篩查與MHBs-mut蛋白相互作用的肝細胞蛋白,併在酵母細胞內驗證蛋白的相互作用.結果 構建酵母雙雜交誘餌載體,穫得重組質粒pGBKT7- MHBs-mut.Western blot顯示其在酵母中錶達MHBs-mut蛋白.酵母雙雜交篩選併驗證,得到與MHBs-mut蛋白相互作用的肝細胞蛋白:COP9信號體第五箇亞單位(COPS5,又名C- Jun結閤蛋白 1,c-Jun-activation-domain binding protein 1, JAB1).結論 乙型肝炎病毒錶麵抗原中蛋白與COPS5在酵母AH109細胞中具有相互作用.
목적 사선여을형간염병독표면항원중단백(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)상호작용적간세포단백.방법 PCR확증MHBs편마기인병장S구기시밀마자돌변,획득목적 기인MHBs-mut,극륭우유이재체pGBKT7.재증실MHBs-mut단백불구유자격활작용적전제하,이효모쌍잡교계통사사여MHBs-mut단백상호작용적간세포단백,병재효모세포내험증단백적상호작용.결과 구건효모쌍잡교유이재체,획득중조질립pGBKT7- MHBs-mut.Western blot현시기재효모중표체MHBs-mut단백.효모쌍잡교사선병험증,득도여MHBs-mut단백상호작용적간세포단백:COP9신호체제오개아단위(COPS5,우명C- Jun결합단백 1,c-Jun-activation-domain binding protein 1, JAB1).결론 을형간염병독표면항원중단백여COPS5재효모AH109세포중구유상호작용.