中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
1期
12-16
,共5页
骨髓间充质干细胞%分离%鉴定%低渗原理%自然沉降%细胞形态%细胞表型%细胞功能
骨髓間充質榦細胞%分離%鑒定%低滲原理%自然沉降%細胞形態%細胞錶型%細胞功能
골수간충질간세포%분리%감정%저삼원리%자연침강%세포형태%세포표형%세포공능
背景:骨髓间充质干细胞数量极少,10万个骨髓有核细胞中才有1个骨髓间充质干细胞,如何成功分离并鉴定骨髓间充质干细胞是研究中的关键工作.目的:建立完善的骨髓间充质干细胞体外分离培养体系,从细胞的形态、表型和功能方面鉴定骨髓间充质干细胞.方法:低渗原理去除杂细胞,结合自然沉降分离骨髓间充质细胞,并对其形态学特征进行光镜观察.对骨髓间充质细胞的表型进行流式细胞仪检测.并将骨髓间充质细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行诱导分化,行形态学观察和碱性磷酸酶、Von kossa、Ⅰ型胶原、油红O染色检测.结果与结论:实验分离获取的骨髓间充质细胞经表型鉴定为:CD29(+),CD45(-);向成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶、矿化结节染色及Ⅰ型胶原检测均为阳性;向脂肪细胞诱导后,油红O染色阳性.结果表明实验分离的骨髓间充质细胞为类成纤维细胞样非造血类干细胞,此类细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的功能.
揹景:骨髓間充質榦細胞數量極少,10萬箇骨髓有覈細胞中纔有1箇骨髓間充質榦細胞,如何成功分離併鑒定骨髓間充質榦細胞是研究中的關鍵工作.目的:建立完善的骨髓間充質榦細胞體外分離培養體繫,從細胞的形態、錶型和功能方麵鑒定骨髓間充質榦細胞.方法:低滲原理去除雜細胞,結閤自然沉降分離骨髓間充質細胞,併對其形態學特徵進行光鏡觀察.對骨髓間充質細胞的錶型進行流式細胞儀檢測.併將骨髓間充質細胞嚮成骨細胞和脂肪細胞進行誘導分化,行形態學觀察和堿性燐痠酶、Von kossa、Ⅰ型膠原、油紅O染色檢測.結果與結論:實驗分離穫取的骨髓間充質細胞經錶型鑒定為:CD29(+),CD45(-);嚮成骨細胞誘導後,堿性燐痠酶、礦化結節染色及Ⅰ型膠原檢測均為暘性;嚮脂肪細胞誘導後,油紅O染色暘性.結果錶明實驗分離的骨髓間充質細胞為類成纖維細胞樣非造血類榦細胞,此類細胞具有嚮成骨細胞和脂肪細胞分化的功能.
배경:골수간충질간세포수량겁소,10만개골수유핵세포중재유1개골수간충질간세포,여하성공분리병감정골수간충질간세포시연구중적관건공작.목적:건립완선적골수간충질간세포체외분리배양체계,종세포적형태、표형화공능방면감정골수간충질간세포.방법:저삼원리거제잡세포,결합자연침강분리골수간충질세포,병대기형태학특정진행광경관찰.대골수간충질세포적표형진행류식세포의검측.병장골수간충질세포향성골세포화지방세포진행유도분화,행형태학관찰화감성린산매、Von kossa、Ⅰ형효원、유홍O염색검측.결과여결론:실험분리획취적골수간충질세포경표형감정위:CD29(+),CD45(-);향성골세포유도후,감성린산매、광화결절염색급Ⅰ형효원검측균위양성;향지방세포유도후,유홍O염색양성.결과표명실험분리적골수간충질세포위류성섬유세포양비조혈류간세포,차류세포구유향성골세포화지방세포분화적공능.
