中国肿瘤临床
中國腫瘤臨床
중국종류림상
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
2011年
7期
372-376
,共5页
杜伟娇%于津浦%李慧%李润美%于文文%安秀梅%张乃宁%曹水%任秀宝
杜偉嬌%于津浦%李慧%李潤美%于文文%安秀梅%張迺寧%曹水%任秀寶
두위교%우진포%리혜%리윤미%우문문%안수매%장내저%조수%임수보
乳腺癌%髓系来源抑制细胞%吲哚胺2,3双加氧酶%CD33+细胞
乳腺癌%髓繫來源抑製細胞%吲哚胺2,3雙加氧酶%CD33+細胞
유선암%수계래원억제세포%신타알2,3쌍가양매%CD33+세포
目的:建立正常CD33+细胞与肿瘤细胞共培养系统,模拟肿瘤局部髓系来源抑制细胞的诱导过程,观察吲哚胺2,3双加氧酶在MDSCs中表达及其免疫抑制作用,并探讨MDSCs中IDO表达相关机制.方法:免疫磁珠分选健康供者CD33+细胞,体外与乳腺癌细胞系MDA-MB-231共孵育诱导MDSCs,以单独培养CD33+细胞为对照组,培养2天后收获实验组MDSCs及对照组CD33+细胞,流式细胞仪检测细胞表型;实时定量PCR和Western Blotting方法检测IDO和STAT3的表达与活化情况;Annexin V-FITC的方法检测MDSCs对T细胞促凋亡作用,并观察IDO在MDSCs诱导T细胞凋亡中的作用.结果:正常CD33+细胞与MDA-MB-231共孵育2天后,出现一群表型为Lin-CD33+13+CD14-CD15-的MDSCs,体外诱导的MDSCs中IDOmRNA及蛋白表达增加、STAT3蛋白磷酸化增强,经过STAT3磷酸化抑制剂JSI-124预处理后,MDSCs中IDO蛋白表达明显降低并可诱导高百分比T细胞凋亡,经IDO抑制剂1-MT处理后T细胞凋亡显著降低.结论:体外将乳腺癌细胞系与正常CD33+细胞共孵育可以诱导出具有独特表型特征和免疫抑制活性的MDSCs,而STAT3磷酸化导致的IDO表达升高可能是MDSCs抑制T细胞功能的主要机制之一.
目的:建立正常CD33+細胞與腫瘤細胞共培養繫統,模擬腫瘤跼部髓繫來源抑製細胞的誘導過程,觀察吲哚胺2,3雙加氧酶在MDSCs中錶達及其免疫抑製作用,併探討MDSCs中IDO錶達相關機製.方法:免疫磁珠分選健康供者CD33+細胞,體外與乳腺癌細胞繫MDA-MB-231共孵育誘導MDSCs,以單獨培養CD33+細胞為對照組,培養2天後收穫實驗組MDSCs及對照組CD33+細胞,流式細胞儀檢測細胞錶型;實時定量PCR和Western Blotting方法檢測IDO和STAT3的錶達與活化情況;Annexin V-FITC的方法檢測MDSCs對T細胞促凋亡作用,併觀察IDO在MDSCs誘導T細胞凋亡中的作用.結果:正常CD33+細胞與MDA-MB-231共孵育2天後,齣現一群錶型為Lin-CD33+13+CD14-CD15-的MDSCs,體外誘導的MDSCs中IDOmRNA及蛋白錶達增加、STAT3蛋白燐痠化增彊,經過STAT3燐痠化抑製劑JSI-124預處理後,MDSCs中IDO蛋白錶達明顯降低併可誘導高百分比T細胞凋亡,經IDO抑製劑1-MT處理後T細胞凋亡顯著降低.結論:體外將乳腺癌細胞繫與正常CD33+細胞共孵育可以誘導齣具有獨特錶型特徵和免疫抑製活性的MDSCs,而STAT3燐痠化導緻的IDO錶達升高可能是MDSCs抑製T細胞功能的主要機製之一.
목적:건립정상CD33+세포여종류세포공배양계통,모의종류국부수계래원억제세포적유도과정,관찰신타알2,3쌍가양매재MDSCs중표체급기면역억제작용,병탐토MDSCs중IDO표체상관궤제.방법:면역자주분선건강공자CD33+세포,체외여유선암세포계MDA-MB-231공부육유도MDSCs,이단독배양CD33+세포위대조조,배양2천후수획실험조MDSCs급대조조CD33+세포,류식세포의검측세포표형;실시정량PCR화Western Blotting방법검측IDO화STAT3적표체여활화정황;Annexin V-FITC적방법검측MDSCs대T세포촉조망작용,병관찰IDO재MDSCs유도T세포조망중적작용.결과:정상CD33+세포여MDA-MB-231공부육2천후,출현일군표형위Lin-CD33+13+CD14-CD15-적MDSCs,체외유도적MDSCs중IDOmRNA급단백표체증가、STAT3단백린산화증강,경과STAT3린산화억제제JSI-124예처리후,MDSCs중IDO단백표체명현강저병가유도고백분비T세포조망,경IDO억제제1-MT처리후T세포조망현저강저.결론:체외장유선암세포계여정상CD33+세포공부육가이유도출구유독특표형특정화면역억제활성적MDSCs,이STAT3린산화도치적IDO표체승고가능시MDSCs억제T세포공능적주요궤제지일.
