中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
5期
423-426
,共4页
江楠%席晓兰%王杰%戴佳琳%廖兴江%黄江
江楠%席曉蘭%王傑%戴佳琳%廖興江%黃江
강남%석효란%왕걸%대가림%료흥강%황강
猪带绦虫%苹果酸脱氢酶基因%基因克隆%原核表达
豬帶縚蟲%蘋果痠脫氫酶基因%基因剋隆%原覈錶達
저대조충%평과산탈경매기인%기인극륭%원핵표체
目的 对猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆,表达及免疫学特性的初步研究.方法 将猪带绦虫MDH基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blot)进行免疫学分析.结果 成功构建pET-28a(+)-MDH重组质粒,并获得高纯度蛋白,该重组蛋白可被其免疫SD大鼠血清识别,同时也能被感染猪带绦虫的病人及猪、感染牛带绦虫病人及感染亚带绦虫病人血清所识别.结论 猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
目的 對豬帶縚蟲蘋果痠脫氫酶基因(malate dehydrogenase,MDH)進行剋隆,錶達及免疫學特性的初步研究.方法 將豬帶縚蟲MDH基因剋隆到原覈錶達質粒pET-28a(+)中,在大腸埃希菌BL21/DE3中用異丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,錶達產物通過十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進行鑒定,用鎳離子金屬螯閤劑親和層析柱進行純化,純化的重組蛋白用蛋白印跡(Western Blot)進行免疫學分析.結果 成功構建pET-28a(+)-MDH重組質粒,併穫得高純度蛋白,該重組蛋白可被其免疫SD大鼠血清識彆,同時也能被感染豬帶縚蟲的病人及豬、感染牛帶縚蟲病人及感染亞帶縚蟲病人血清所識彆.結論 豬帶縚蟲蘋果痠脫氫酶基因可在原覈錶達繫統中穫得具有免疫學活性的高效錶達,為進一步研究該蛋白的功能奠定瞭基礎.
목적 대저대조충평과산탈경매기인(malate dehydrogenase,MDH)진행극륭,표체급면역학특성적초보연구.방법 장저대조충MDH기인극륭도원핵표체질립pET-28a(+)중,재대장애희균BL21/DE3중용이병기-β-D-반유당감(IPTG)유도표체,표체산물통과십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)진행감정,용얼리자금속오합제친화층석주진행순화,순화적중조단백용단백인적(Western Blot)진행면역학분석.결과 성공구건pET-28a(+)-MDH중조질립,병획득고순도단백,해중조단백가피기면역SD대서혈청식별,동시야능피감염저대조충적병인급저、감염우대조충병인급감염아대조충병인혈청소식별.결론 저대조충평과산탈경매기인가재원핵표체계통중획득구유면역학활성적고효표체,위진일보연구해단백적공능전정료기출.
