中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2012年
5期
260-266
,共7页
叶苏娟%杨蔚菡%王宇%欧文婧%马清平%朱文
葉囌娟%楊蔚菡%王宇%歐文婧%馬清平%硃文
협소연%양위함%왕우%구문청%마청평%주문
iNOS基因%肺肿瘤%A549细胞株%基因治疗%真核表达载体
iNOS基因%肺腫瘤%A549細胞株%基因治療%真覈錶達載體
iNOS기인%폐종류%A549세포주%기인치료%진핵표체재체
背景与目的 iNOS与NO介导的抗肿瘤效应有关.本研究旨在构建pVAX-iNOS载体并转染A549肺癌细胞,检测其基因的表达并初步探讨iNOS基因表达增高后对A549肺癌细胞的抗肿瘤作用.方法 应用RT-PCR方法扩增人iNOS编码序列的CDS片段,构建pVAX-iNOS载体后转染肺癌A549细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测目的基因的表达；采用MTT法、Hoechst 3235染色和划痕实验分别检测iNOS高表达在体外对肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移作用的影响.结果 真核表达质粒载体pVAX-iNOS构建成功,iNOS蛋白在转染后的A549细胞中表达升高.pVAX-iNOS转染A549肺癌细胞后能明显诱导细胞发生凋亡并抑制肿瘤细胞的生长和迁移.结论 本研究成功构建pVAX-iNOS真核表达质粒,高表达iNOS能明显抑制A549细胞的增殖、迁移并促进细胞发生凋亡.本研究有望为临床治疗肺癌提供一个新的有效策略.
揹景與目的 iNOS與NO介導的抗腫瘤效應有關.本研究旨在構建pVAX-iNOS載體併轉染A549肺癌細胞,檢測其基因的錶達併初步探討iNOS基因錶達增高後對A549肺癌細胞的抗腫瘤作用.方法 應用RT-PCR方法擴增人iNOS編碼序列的CDS片段,構建pVAX-iNOS載體後轉染肺癌A549細胞,通過RT-PCR和Western blot方法檢測目的基因的錶達；採用MTT法、Hoechst 3235染色和劃痕實驗分彆檢測iNOS高錶達在體外對肺癌A549細胞增殖、凋亡和遷移作用的影響.結果 真覈錶達質粒載體pVAX-iNOS構建成功,iNOS蛋白在轉染後的A549細胞中錶達升高.pVAX-iNOS轉染A549肺癌細胞後能明顯誘導細胞髮生凋亡併抑製腫瘤細胞的生長和遷移.結論 本研究成功構建pVAX-iNOS真覈錶達質粒,高錶達iNOS能明顯抑製A549細胞的增殖、遷移併促進細胞髮生凋亡.本研究有望為臨床治療肺癌提供一箇新的有效策略.
배경여목적 iNOS여NO개도적항종류효응유관.본연구지재구건pVAX-iNOS재체병전염A549폐암세포,검측기기인적표체병초보탐토iNOS기인표체증고후대A549폐암세포적항종류작용.방법 응용RT-PCR방법확증인iNOS편마서렬적CDS편단,구건pVAX-iNOS재체후전염폐암A549세포,통과RT-PCR화Western blot방법검측목적기인적표체；채용MTT법、Hoechst 3235염색화화흔실험분별검측iNOS고표체재체외대폐암A549세포증식、조망화천이작용적영향.결과 진핵표체질립재체pVAX-iNOS구건성공,iNOS단백재전염후적A549세포중표체승고.pVAX-iNOS전염A549폐암세포후능명현유도세포발생조망병억제종류세포적생장화천이.결론 본연구성공구건pVAX-iNOS진핵표체질립,고표체iNOS능명현억제A549세포적증식、천이병촉진세포발생조망.본연구유망위림상치료폐암제공일개신적유효책략.
