遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2005年
3期
442-446
,共5页
邱钢%曾庆韬%金珊%钱远槐
邱鋼%曾慶韜%金珊%錢遠槐
구강%증경도%금산%전원괴
高变异区%PCR%三步法
高變異區%PCR%三步法
고변이구%PCR%삼보법
分子进化研究中所遇到的一个常见问题是某些基因的目标区域进化较快而难以用特定引物在不同种属间进行有效扩增,而这将影响到整个实验的进程和全部结果的综合分析.虽然巢式和半巢式PCR等能显著提高扩增的特异性,但应用于高变异区的扩增结果仍是杂带多或涂抹严重,不能满足后续实验需要.在果蝇Fak56D基因的研究中需要扩增不同属及黑腹果蝇种组不同种亚组的相关片段,由于该DNA区域变异较显著,常用扩增方法对大部分材料的效果都很不理想.实验创造性组合了一套经济实用的扩增方法,即巢式或半巢式PCR结合定向DNA片段胶回收技术后再扩增的三步扩增法,得到了令人满意的扩增结果,为下一步的克隆、测序等研究创造了必要条件.
分子進化研究中所遇到的一箇常見問題是某些基因的目標區域進化較快而難以用特定引物在不同種屬間進行有效擴增,而這將影響到整箇實驗的進程和全部結果的綜閤分析.雖然巢式和半巢式PCR等能顯著提高擴增的特異性,但應用于高變異區的擴增結果仍是雜帶多或塗抹嚴重,不能滿足後續實驗需要.在果蠅Fak56D基因的研究中需要擴增不同屬及黑腹果蠅種組不同種亞組的相關片段,由于該DNA區域變異較顯著,常用擴增方法對大部分材料的效果都很不理想.實驗創造性組閤瞭一套經濟實用的擴增方法,即巢式或半巢式PCR結閤定嚮DNA片段膠迴收技術後再擴增的三步擴增法,得到瞭令人滿意的擴增結果,為下一步的剋隆、測序等研究創造瞭必要條件.
분자진화연구중소우도적일개상견문제시모사기인적목표구역진화교쾌이난이용특정인물재불동충속간진행유효확증,이저장영향도정개실험적진정화전부결과적종합분석.수연소식화반소식PCR등능현저제고확증적특이성,단응용우고변이구적확증결과잉시잡대다혹도말엄중,불능만족후속실험수요.재과승Fak56D기인적연구중수요확증불동속급흑복과승충조불동충아조적상관편단,유우해DNA구역변이교현저,상용확증방법대대부분재료적효과도흔불이상.실험창조성조합료일투경제실용적확증방법,즉소식혹반소식PCR결합정향DNA편단효회수기술후재확증적삼보확증법,득도료령인만의적확증결과,위하일보적극륭、측서등연구창조료필요조건.
