CAJ | 학술논문

目的:应用免疫组织化学和蛋白印迹方法来观察帕金森病模型大鼠D1和D2多巴胺受体(64周)的长时程变化.方法:实验于2003-10/2005-03在首都医科大学北京神经科学研究所、北京市神经再生修复研究重点实验室完成.①选择SD雌性大鼠78只,随机分为模型组72只和正常组6只.造模后2,4,8,16,32,64周进行实验,每个时间点取6只模型大鼠用于免疫组织化学染色,另外6只模型大鼠和1只正常大鼠用于进行Western blotting分析.②观察模型大鼠黑质和纹状体多巴胺D1受体和多巴胺D2受体免疫组织化学染色强度.③Western blotting用来测定模型大鼠相对于正常大鼠纹状体多巴胺D1受体和多巴胺D2受体蛋白含量.结果:78只大鼠均进入结果分析.①损伤2周后模型大鼠损伤侧纹状体的多巴胺1型受体免疫反应在2周和4周要弱于损伤对侧,8周及以后损伤侧纹状体内多巴胺1型受体免疫反应与损伤对侧没有显著性差异.损伤侧黑质的多巴胺1型受体阳性强度一直要弱于损伤对侧约20%,多巴胺1型受体阳性面积也小于损伤对侧.而纹状体内多巴胺2型受体的免疫反应则刚好相反,即损伤侧则强于健侧,从2周就开始上升约15%,到16周上升到顶峰(约30%),之后下降,于64周时下降到约5%.损伤侧黑质的多巴胺2型受体与酪氨酸羟化酶染色相似,几乎为阴性.②多巴胺D2受体在损伤侧纹状体从2周时开始上调,到16周达到高峰后回落,直到64周仍高于正常水平.与多巴胺D2受体相反,多巴胺D1受体在损伤侧纹状体于2周和4周下调,到8周以后恢复到正常水平.同时,多巴胺D1受体免疫反应强度在损伤侧黑质表达持续减弱且阳性面积也减小.结论:帕金森病在纹状体失去多巴胺能神经支配后多巴胺D2受体上调,多巴胺D1受体先下调后恢复正常水平.
목적:응용면역조직화학화단백인적방법래관찰파금삼병모형대서D1화D2다파알수체(64주)적장시정변화.방법:실험우2003-10/2005-03재수도의과대학북경신경과학연구소、북경시신경재생수복연구중점실험실완성.①선택SD자성대서78지,수궤분위모형조72지화정상조6지.조모후2,4,8,16,32,64주진행실험,매개시간점취6지모형대서용우면역조직화학염색,령외6지모형대서화1지정상대서용우진행Western blotting분석.②관찰모형대서흑질화문상체다파알D1수체화다파알D2수체면역조직화학염색강도.③Western blotting용래측정모형대서상대우정상대서문상체다파알D1수체화다파알D2수체단백함량.결과:78지대서균진입결과분석.①손상2주후모형대서손상측문상체적다파알1형수체면역반응재2주화4주요약우손상대측,8주급이후손상측문상체내다파알1형수체면역반응여손상대측몰유현저성차이.손상측흑질적다파알1형수체양성강도일직요약우손상대측약20%,다파알1형수체양성면적야소우손상대측.이문상체내다파알2형수체적면역반응칙강호상반,즉손상측칙강우건측,종2주취개시상승약15%,도16주상승도정봉(약30%),지후하강,우64주시하강도약5%.손상측흑질적다파알2형수체여락안산간화매염색상사,궤호위음성.②다파알D2수체재손상측문상체종2주시개시상조,도16주체도고봉후회락,직도64주잉고우정상수평.여다파알D2수체상반,다파알D1수체재손상측문상체우2주화4주하조,도8주이후회복도정상수평.동시,다파알D1수체면역반응강도재손상측흑질표체지속감약차양성면적야감소.결론:파금삼병재문상체실거다파알능신경지배후다파알D2수체상조,다파알D1수체선하조후회복정상수평.