畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
3期
301-306
,共6页
韩威%李碧春%陈国宏%秦洁%朱云芬%周冠月%张学余
韓威%李碧春%陳國宏%秦潔%硃雲芬%週冠月%張學餘
한위%리벽춘%진국굉%진길%주운분%주관월%장학여
鸡%原始生殖细胞%玻璃化冷冻%培养传代
鷄%原始生殖細胞%玻璃化冷凍%培養傳代
계%원시생식세포%파리화냉동%배양전대
对发育至第19期和第28期鸡胚性腺原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs),用6种玻璃化冷冻液Ⅰ:10%DMSO+10%EG+10%PVP,Ⅱ:20%EG+10%PVP,Ⅲ:20%DMSO+10%PVP,Ⅳ:10%DMSO+10%EG十0.5 mol/L Surcose,Ⅴ:20%EG+0.5 mol/L Surcose,Ⅵ:20%DMSO+0.5 mol/L Surcose进行冷冻保存.结果:第19期鸡胚PGCs玻璃化冷冻复苏后存活率,在冷冻液Ⅱ与Ⅳ之间差异不显著(P＞0.05),Ⅴ与Ⅵ之间差异显著(P＜0.05),其余各冷冻液之间差异均极显著(P＜0.01).第28期鸡胚PGCs玻璃化冷冻复苏后存活率,在冷冻液Ⅳ与Ⅴ之间差异显著(P＜0.05),Ⅲ与Ⅳ、Ⅴ之间差异不显著(P＞0.05),Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ之间差异不显著(P＞0.05),其余各玻璃化冷冻液之间差异均极显著(P＜0.01).复苏后接种培养传至第2代的鸡胚PGCs细胞,PAS染色、AKP染色呈阳性并保持完整的二倍体核型.
對髮育至第19期和第28期鷄胚性腺原始生殖細胞(Primordial germ cells,PGCs),用6種玻璃化冷凍液Ⅰ:10%DMSO+10%EG+10%PVP,Ⅱ:20%EG+10%PVP,Ⅲ:20%DMSO+10%PVP,Ⅳ:10%DMSO+10%EG十0.5 mol/L Surcose,Ⅴ:20%EG+0.5 mol/L Surcose,Ⅵ:20%DMSO+0.5 mol/L Surcose進行冷凍保存.結果:第19期鷄胚PGCs玻璃化冷凍複囌後存活率,在冷凍液Ⅱ與Ⅳ之間差異不顯著(P＞0.05),Ⅴ與Ⅵ之間差異顯著(P＜0.05),其餘各冷凍液之間差異均極顯著(P＜0.01).第28期鷄胚PGCs玻璃化冷凍複囌後存活率,在冷凍液Ⅳ與Ⅴ之間差異顯著(P＜0.05),Ⅲ與Ⅳ、Ⅴ之間差異不顯著(P＞0.05),Ⅱ與Ⅲ、Ⅳ之間差異不顯著(P＞0.05),其餘各玻璃化冷凍液之間差異均極顯著(P＜0.01).複囌後接種培養傳至第2代的鷄胚PGCs細胞,PAS染色、AKP染色呈暘性併保持完整的二倍體覈型.
대발육지제19기화제28기계배성선원시생식세포(Primordial germ cells,PGCs),용6충파리화냉동액Ⅰ:10%DMSO+10%EG+10%PVP,Ⅱ:20%EG+10%PVP,Ⅲ:20%DMSO+10%PVP,Ⅳ:10%DMSO+10%EG십0.5 mol/L Surcose,Ⅴ:20%EG+0.5 mol/L Surcose,Ⅵ:20%DMSO+0.5 mol/L Surcose진행냉동보존.결과:제19기계배PGCs파리화냉동복소후존활솔,재냉동액Ⅱ여Ⅳ지간차이불현저(P＞0.05),Ⅴ여Ⅵ지간차이현저(P＜0.05),기여각냉동액지간차이균겁현저(P＜0.01).제28기계배PGCs파리화냉동복소후존활솔,재냉동액Ⅳ여Ⅴ지간차이현저(P＜0.05),Ⅲ여Ⅳ、Ⅴ지간차이불현저(P＞0.05),Ⅱ여Ⅲ、Ⅳ지간차이불현저(P＞0.05),기여각파리화냉동액지간차이균겁현저(P＜0.01).복소후접충배양전지제2대적계배PGCs세포,PAS염색、AKP염색정양성병보지완정적이배체핵형.
