重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
5期
503-505,517
,共4页
欧俐苹%罗春丽%郭永灿%赵懿
歐俐蘋%囉春麗%郭永燦%趙懿
구리평%라춘려%곽영찬%조의
PLCε%siRNA%质粒%转染%膀胱移行细胞癌
PLCε%siRNA%質粒%轉染%膀胱移行細胞癌
PLCε%siRNA%질립%전염%방광이행세포암
目的:研究磷脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)siRNA表达质粒的转染对人膀胱癌细胞系T24侵袭转移能力的影响.方法:分别将携有PLCε siRNA基因的真核表达质粒两对p11-PLCε和p12-PLCε载体体外转染T24细胞,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测PLCε mRNA的表达情况,应用Transwell小室侵袭试验、明胶酶谱分析分别研究转染前、后膀胱癌细胞侵袭转移能力的变化,并以空载质粒HK-A转染和未转染细胞为对照.结果:RT-PCR检测显示p11-PLCε,p12-PLCε转染成功后T24细胞PLCεmRNA表达明显比空质粒HK-A转染和未转染细胞减弱;p12-PLCε siRNA转染细胞穿透侵袭小室滤膜的数目(26.8±5.8)和p11-PLCεsiRNA转染细胞穿透侵袭小室滤膜的数目(25.8±6.2)明显少于未转染细胞(34.8±6.9)和HK-A转染细胞(33.8±5.7)(P＜0.01);明胶酶谱分析显示转染P11-PLCε、p12-PLCε均使细胞分泌MMP-2、MMP-9明显低于未转染细胞和HK-A转染细胞.结论:推测转染外源性PLCεsiRNA基因能下调PLCε基因的表达并能抑制膀胱癌细胞侵袭转移.
目的:研究燐脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)siRNA錶達質粒的轉染對人膀胱癌細胞繫T24侵襲轉移能力的影響.方法:分彆將攜有PLCε siRNA基因的真覈錶達質粒兩對p11-PLCε和p12-PLCε載體體外轉染T24細胞,篩選穩定轉染的細胞併擴增培養,用逆轉錄聚閤酶鏈反應法(RT-PCR)檢測PLCε mRNA的錶達情況,應用Transwell小室侵襲試驗、明膠酶譜分析分彆研究轉染前、後膀胱癌細胞侵襲轉移能力的變化,併以空載質粒HK-A轉染和未轉染細胞為對照.結果:RT-PCR檢測顯示p11-PLCε,p12-PLCε轉染成功後T24細胞PLCεmRNA錶達明顯比空質粒HK-A轉染和未轉染細胞減弱;p12-PLCε siRNA轉染細胞穿透侵襲小室濾膜的數目(26.8±5.8)和p11-PLCεsiRNA轉染細胞穿透侵襲小室濾膜的數目(25.8±6.2)明顯少于未轉染細胞(34.8±6.9)和HK-A轉染細胞(33.8±5.7)(P＜0.01);明膠酶譜分析顯示轉染P11-PLCε、p12-PLCε均使細胞分泌MMP-2、MMP-9明顯低于未轉染細胞和HK-A轉染細胞.結論:推測轉染外源性PLCεsiRNA基因能下調PLCε基因的錶達併能抑製膀胱癌細胞侵襲轉移.
목적:연구린지매C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)siRNA표체질립적전염대인방광암세포계T24침습전이능력적영향.방법:분별장휴유PLCε siRNA기인적진핵표체질립량대p11-PLCε화p12-PLCε재체체외전염T24세포,사선은정전염적세포병확증배양,용역전록취합매련반응법(RT-PCR)검측PLCε mRNA적표체정황,응용Transwell소실침습시험、명효매보분석분별연구전염전、후방광암세포침습전이능력적변화,병이공재질립HK-A전염화미전염세포위대조.결과:RT-PCR검측현시p11-PLCε,p12-PLCε전염성공후T24세포PLCεmRNA표체명현비공질립HK-A전염화미전염세포감약;p12-PLCε siRNA전염세포천투침습소실려막적수목(26.8±5.8)화p11-PLCεsiRNA전염세포천투침습소실려막적수목(25.8±6.2)명현소우미전염세포(34.8±6.9)화HK-A전염세포(33.8±5.7)(P＜0.01);명효매보분석현시전염P11-PLCε、p12-PLCε균사세포분비MMP-2、MMP-9명현저우미전염세포화HK-A전염세포.결론:추측전염외원성PLCεsiRNA기인능하조PLCε기인적표체병능억제방광암세포침습전이.
