畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
9期
1346-1352
,共7页
胡艳霞%曾勇庆%崔志峰%杨伦%陈伟%陈其美%石元%祝洪磊
鬍豔霞%曾勇慶%崔誌峰%楊倫%陳偉%陳其美%石元%祝洪磊
호염하%증용경%최지봉%양륜%진위%진기미%석원%축홍뢰
莱芜猪%前体脂肪细胞%细胞培养%诱导分化
萊蕪豬%前體脂肪細胞%細胞培養%誘導分化
래무저%전체지방세포%세포배양%유도분화
为了建立莱芜猪前体脂肪细胞的体外培养体系,探索猪脂肪组织增生的生物学特征.本研究采集1日龄莱芜猪仔猪颈、背部皮下脂肪组织,采用胶原酶与胰蛋白酶相结合的方法,分离原代前体脂肪细胞,进行前体脂肪细胞的原代和传代培养,以及前体脂肪细胞诱导分化的研究,并采用Real-time PCR方法检测前体脂肪细胞分化过程中关键基因PPARγ的表达.结果表明,分离的猪原代前体脂肪细胞约8h后开始贴壁,贴壁的细胞呈短梭形或不规则的三角形,第3天多数细胞进入指数生长期,呈成纤维细胞样形态,细胞生长曲线近似S形；诱导培养结果显示,少量细胞在第2天开始出现脂滴,大多数细胞在第3天出现脂滴,第7～8天小脂滴逐渐融合成大脂滴,在第12天左右融合成大脂滴,油红O染色呈橘红色.在前体脂肪细胞分化过程中PPARγ基因mRNA的表达量逐渐增加,在诱导后的48 h表达量最高,随后其表达丰度逐渐下降.本试验成功建立了莱芜猪前体脂肪细胞培养体系和体外诱导分化模型,为进一步研究莱芜猪前体脂肪细胞增殖与分化机制和猪体脂肪的沉积奠定基础.
為瞭建立萊蕪豬前體脂肪細胞的體外培養體繫,探索豬脂肪組織增生的生物學特徵.本研究採集1日齡萊蕪豬仔豬頸、揹部皮下脂肪組織,採用膠原酶與胰蛋白酶相結閤的方法,分離原代前體脂肪細胞,進行前體脂肪細胞的原代和傳代培養,以及前體脂肪細胞誘導分化的研究,併採用Real-time PCR方法檢測前體脂肪細胞分化過程中關鍵基因PPARγ的錶達.結果錶明,分離的豬原代前體脂肪細胞約8h後開始貼壁,貼壁的細胞呈短梭形或不規則的三角形,第3天多數細胞進入指數生長期,呈成纖維細胞樣形態,細胞生長麯線近似S形；誘導培養結果顯示,少量細胞在第2天開始齣現脂滴,大多數細胞在第3天齣現脂滴,第7～8天小脂滴逐漸融閤成大脂滴,在第12天左右融閤成大脂滴,油紅O染色呈橘紅色.在前體脂肪細胞分化過程中PPARγ基因mRNA的錶達量逐漸增加,在誘導後的48 h錶達量最高,隨後其錶達豐度逐漸下降.本試驗成功建立瞭萊蕪豬前體脂肪細胞培養體繫和體外誘導分化模型,為進一步研究萊蕪豬前體脂肪細胞增殖與分化機製和豬體脂肪的沉積奠定基礎.
위료건립래무저전체지방세포적체외배양체계,탐색저지방조직증생적생물학특정.본연구채집1일령래무저자저경、배부피하지방조직,채용효원매여이단백매상결합적방법,분리원대전체지방세포,진행전체지방세포적원대화전대배양,이급전체지방세포유도분화적연구,병채용Real-time PCR방법검측전체지방세포분화과정중관건기인PPARγ적표체.결과표명,분리적저원대전체지방세포약8h후개시첩벽,첩벽적세포정단사형혹불규칙적삼각형,제3천다수세포진입지수생장기,정성섬유세포양형태,세포생장곡선근사S형；유도배양결과현시,소량세포재제2천개시출현지적,대다수세포재제3천출현지적,제7～8천소지적축점융합성대지적,재제12천좌우융합성대지적,유홍O염색정귤홍색.재전체지방세포분화과정중PPARγ기인mRNA적표체량축점증가,재유도후적48 h표체량최고,수후기표체봉도축점하강.본시험성공건립료래무저전체지방세포배양체계화체외유도분화모형,위진일보연구래무저전체지방세포증식여분화궤제화저체지방적침적전정기출.
