科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2003年
4期
358-363
,共6页
严远鑫%安成才%栗力%古佳玉%王莉江%米双利%陈章良
嚴遠鑫%安成纔%慄力%古佳玉%王莉江%米雙利%陳章良
엄원흠%안성재%률력%고가옥%왕리강%미쌍리%진장량
水稻%赤霉素20-氧化酶%反义%正义%转基因
水稻%赤黴素20-氧化酶%反義%正義%轉基因
수도%적매소20-양화매%반의%정의%전기인
通过PCR方法从水稻"矮子占"和"南特号"的基因组DNA中分离出赤霉素20-氧化酶基因rga5, 其编码区含1119 bp. 其编码蛋白与已报道的水稻赤霉素20-氧化酶基因OsGA20ox相比有11个氨基酸不同, 其中9个氨基酸为移码差异. 通过基因枪法将该基因的正、反义表达质粒pSrga5和pArga5转化水稻"中花8号", 获得了生物学性状有明显变异的转基因植株. 正义转化表现出植株增高、叶片和穗变长、穗粒数增加等特征, 但花期未受明显的影响; 而反义植株表现出明显的"矮化"和"早花", 且出现植株细弱、叶色加深、叶片和穗变短等特征. 转基因水稻的分析结果表明, rga5正、反义外源基因已分别整合到水稻基因组中, 并有效表达; 正义植株体内的GA1平均增加约50%, 反义则降低至对照组的约10%. 结果表明, rga5是水稻赤霉素合成代谢途径中起关键作用的赤霉素20-氧化酶基因, 该序列中11个氨基酸的变异并不影响其功能. 正义表达可增强体内GA的合成, 促使植株生长, 增加株高; 反义转化则抑制了内源GA的合成及植株生长, 导致植株明显的矮化.
通過PCR方法從水稻"矮子佔"和"南特號"的基因組DNA中分離齣赤黴素20-氧化酶基因rga5, 其編碼區含1119 bp. 其編碼蛋白與已報道的水稻赤黴素20-氧化酶基因OsGA20ox相比有11箇氨基痠不同, 其中9箇氨基痠為移碼差異. 通過基因鎗法將該基因的正、反義錶達質粒pSrga5和pArga5轉化水稻"中花8號", 穫得瞭生物學性狀有明顯變異的轉基因植株. 正義轉化錶現齣植株增高、葉片和穗變長、穗粒數增加等特徵, 但花期未受明顯的影響; 而反義植株錶現齣明顯的"矮化"和"早花", 且齣現植株細弱、葉色加深、葉片和穗變短等特徵. 轉基因水稻的分析結果錶明, rga5正、反義外源基因已分彆整閤到水稻基因組中, 併有效錶達; 正義植株體內的GA1平均增加約50%, 反義則降低至對照組的約10%. 結果錶明, rga5是水稻赤黴素閤成代謝途徑中起關鍵作用的赤黴素20-氧化酶基因, 該序列中11箇氨基痠的變異併不影響其功能. 正義錶達可增彊體內GA的閤成, 促使植株生長, 增加株高; 反義轉化則抑製瞭內源GA的閤成及植株生長, 導緻植株明顯的矮化.
통과PCR방법종수도"왜자점"화"남특호"적기인조DNA중분리출적매소20-양화매기인rga5, 기편마구함1119 bp. 기편마단백여이보도적수도적매소20-양화매기인OsGA20ox상비유11개안기산불동, 기중9개안기산위이마차이. 통과기인창법장해기인적정、반의표체질립pSrga5화pArga5전화수도"중화8호", 획득료생물학성상유명현변이적전기인식주. 정의전화표현출식주증고、협편화수변장、수립수증가등특정, 단화기미수명현적영향; 이반의식주표현출명현적"왜화"화"조화", 차출현식주세약、협색가심、협편화수변단등특정. 전기인수도적분석결과표명, rga5정、반의외원기인이분별정합도수도기인조중, 병유효표체; 정의식주체내적GA1평균증가약50%, 반의칙강저지대조조적약10%. 결과표명, rga5시수도적매소합성대사도경중기관건작용적적매소20-양화매기인, 해서렬중11개안기산적변이병불영향기공능. 정의표체가증강체내GA적합성, 촉사식주생장, 증가주고; 반의전화칙억제료내원GA적합성급식주생장, 도치식주명현적왜화.
