浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2003年
5期
398-402
,共5页
基因,POLΗ%N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍%非定标性突变%DNA突变分析
基因,POLΗ%N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍%非定標性突變%DNA突變分析
기인,POLΗ%N-갑기-N'-초기-N-아초기고%비정표성돌변%DNA돌변분석
目的:通过建立POLΗ反义阻断细胞系FL-POLΗ-,研究POLΗ的功能.方法:将POLΗ基因的1473～2131片段反向克隆到哺乳动物细胞表达载体pMAMneo-amp-中,将重组表达质粒转染FL细胞,G418筛选,获得POLΗ基因被表达阻断的哺乳动物细胞系FL-POLΗ-.采用穿梭质粒pZ189介导的突变实验,观察在POLΗ基因表达被阻断细胞系中进行复制时的自发突变频率和MNNG引起的诱发突变频率.结果:成功建立细胞系FL-POLΗ-.穿梭质粒pZ189在FL-POLΗ-细胞中复制后,其SupF tRNA基因的自发突变频率为13.5×10-4,而对照细胞FL和FL-M分别为4.9×10-4和3.7×10-4 .同时,质粒在接触过MNNG的FL-POLΗ-细胞中复制,其SupF tRNA基因的非定标性突变频率不发生.结论:POLΗ在维持哺乳类细胞的遗传稳定性中起重要作用,且参与哺乳动物细胞中MNNG引起的非定标性突变.
目的:通過建立POLΗ反義阻斷細胞繫FL-POLΗ-,研究POLΗ的功能.方法:將POLΗ基因的1473～2131片段反嚮剋隆到哺乳動物細胞錶達載體pMAMneo-amp-中,將重組錶達質粒轉染FL細胞,G418篩選,穫得POLΗ基因被錶達阻斷的哺乳動物細胞繫FL-POLΗ-.採用穿梭質粒pZ189介導的突變實驗,觀察在POLΗ基因錶達被阻斷細胞繫中進行複製時的自髮突變頻率和MNNG引起的誘髮突變頻率.結果:成功建立細胞繫FL-POLΗ-.穿梭質粒pZ189在FL-POLΗ-細胞中複製後,其SupF tRNA基因的自髮突變頻率為13.5×10-4,而對照細胞FL和FL-M分彆為4.9×10-4和3.7×10-4 .同時,質粒在接觸過MNNG的FL-POLΗ-細胞中複製,其SupF tRNA基因的非定標性突變頻率不髮生.結論:POLΗ在維持哺乳類細胞的遺傳穩定性中起重要作用,且參與哺乳動物細胞中MNNG引起的非定標性突變.
목적:통과건립POLΗ반의조단세포계FL-POLΗ-,연구POLΗ적공능.방법:장POLΗ기인적1473～2131편단반향극륭도포유동물세포표체재체pMAMneo-amp-중,장중조표체질립전염FL세포,G418사선,획득POLΗ기인피표체조단적포유동물세포계FL-POLΗ-.채용천사질립pZ189개도적돌변실험,관찰재POLΗ기인표체피조단세포계중진행복제시적자발돌변빈솔화MNNG인기적유발돌변빈솔.결과:성공건립세포계FL-POLΗ-.천사질립pZ189재FL-POLΗ-세포중복제후,기SupF tRNA기인적자발돌변빈솔위13.5×10-4,이대조세포FL화FL-M분별위4.9×10-4화3.7×10-4 .동시,질립재접촉과MNNG적FL-POLΗ-세포중복제,기SupF tRNA기인적비정표성돌변빈솔불발생.결론:POLΗ재유지포유류세포적유전은정성중기중요작용,차삼여포유동물세포중MNNG인기적비정표성돌변.
