免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2004年
4期
277-280
,共4页
金宁一%郭志儒%赵怀龙%张茂林
金寧一%郭誌儒%趙懷龍%張茂林
금저일%곽지유%조부룡%장무림
狂犬病毒%重组鸡痘病毒%核酸疫苗%联合免疫
狂犬病毒%重組鷄痘病毒%覈痠疫苗%聯閤免疫
광견병독%중조계두병독%핵산역묘%연합면역
目的构建狂犬病毒糖蛋白重组鸡痘病毒,研究联合运用重组病毒与同一抗原核酸疫苗对小鼠的免疫效果,为狂犬病疫苗的研究提供基础.方法以中国鸡痘病毒疫苗株282E4为基础构建的表达载体pUTA-2的ATI·P7.5复合启动子下游,插入狂犬病毒CTN-181株糖蛋白基因,构建了重组转移载体pUTA-RgC.以脂质体转染法将pUTA-RgC转染至已感染鸡痘病毒282E4株(FPV)2～3 h的鸡胚成纤维(CEF)细胞中.待细胞出现明显病变后收获病毒,用BrdU进行连续3次加压筛选,挑取蚀斑毒株、纯化、扩增,间接免疫荧光鉴定.用重组鸡痘病毒vUTA-RgC单独及与核酸疫苗联合免疫小鼠,在细胞及体液免疫,攻毒保护水平评价所构建的重组病毒及联合免疫效果.结果间接免疫荧光结果表明已成功构建重组鸡痘病毒,免疫后能诱导机体产生细胞与体液免疫,并能抵抗标准攻毒株的攻击,联合免疫效果较为理想.结论获得一株能够表达狂犬病毒糖蛋白的vUTA-RgC,并证明有一定的免疫原性,与核酸疫苗联合应用能够克服各自的缺点.
目的構建狂犬病毒糖蛋白重組鷄痘病毒,研究聯閤運用重組病毒與同一抗原覈痠疫苗對小鼠的免疫效果,為狂犬病疫苗的研究提供基礎.方法以中國鷄痘病毒疫苗株282E4為基礎構建的錶達載體pUTA-2的ATI·P7.5複閤啟動子下遊,插入狂犬病毒CTN-181株糖蛋白基因,構建瞭重組轉移載體pUTA-RgC.以脂質體轉染法將pUTA-RgC轉染至已感染鷄痘病毒282E4株(FPV)2～3 h的鷄胚成纖維(CEF)細胞中.待細胞齣現明顯病變後收穫病毒,用BrdU進行連續3次加壓篩選,挑取蝕斑毒株、純化、擴增,間接免疫熒光鑒定.用重組鷄痘病毒vUTA-RgC單獨及與覈痠疫苗聯閤免疫小鼠,在細胞及體液免疫,攻毒保護水平評價所構建的重組病毒及聯閤免疫效果.結果間接免疫熒光結果錶明已成功構建重組鷄痘病毒,免疫後能誘導機體產生細胞與體液免疫,併能牴抗標準攻毒株的攻擊,聯閤免疫效果較為理想.結論穫得一株能夠錶達狂犬病毒糖蛋白的vUTA-RgC,併證明有一定的免疫原性,與覈痠疫苗聯閤應用能夠剋服各自的缺點.
목적구건광견병독당단백중조계두병독,연구연합운용중조병독여동일항원핵산역묘대소서적면역효과,위광견병역묘적연구제공기출.방법이중국계두병독역묘주282E4위기출구건적표체재체pUTA-2적ATI·P7.5복합계동자하유,삽입광견병독CTN-181주당단백기인,구건료중조전이재체pUTA-RgC.이지질체전염법장pUTA-RgC전염지이감염계두병독282E4주(FPV)2～3 h적계배성섬유(CEF)세포중.대세포출현명현병변후수획병독,용BrdU진행련속3차가압사선,도취식반독주、순화、확증,간접면역형광감정.용중조계두병독vUTA-RgC단독급여핵산역묘연합면역소서,재세포급체액면역,공독보호수평평개소구건적중조병독급연합면역효과.결과간접면역형광결과표명이성공구건중조계두병독,면역후능유도궤체산생세포여체액면역,병능저항표준공독주적공격,연합면역효과교위이상.결론획득일주능구표체광견병독당단백적vUTA-RgC,병증명유일정적면역원성,여핵산역묘연합응용능구극복각자적결점.
