中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2006年
12期
25-27
,共3页
钟金栋%花群义%夏雪山%杨云庆%周晓黎%董俊
鐘金棟%花群義%夏雪山%楊雲慶%週曉黎%董俊
종금동%화군의%하설산%양운경%주효려%동준
猪水泡病病毒%RT-PCR%检测
豬水泡病病毒%RT-PCR%檢測
저수포병병독%RT-PCR%검측
根据基因库中的猪水泡病病毒(SVDV)高度保守的VP1基因的序列,设计了与SVDV互补的2对特异性引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地扩增出251bp和366bp特异性条带,将其克隆入pMD18-T载体中,并进行序列测定,与已发表的SVDV基因比较发现,核苷酸的同源性为100%,证实为SVDV的VP1段基因.通过检测FMDV、VSV、BHK21细胞等,对照的扩增结果均为阴性,验证其特异.对SVDV RNA进行10倍系列稀释后检测,结果SVDV RNA在10-4稀释度时仍能检测到阳性,说明具有较好的敏感性.此项试验能稳定、高效、快速地检测出猪水泡病病毒.
根據基因庫中的豬水泡病病毒(SVDV)高度保守的VP1基因的序列,設計瞭與SVDV互補的2對特異性引物,通過對影響PCR擴增因素的篩選,成功地擴增齣251bp和366bp特異性條帶,將其剋隆入pMD18-T載體中,併進行序列測定,與已髮錶的SVDV基因比較髮現,覈苷痠的同源性為100%,證實為SVDV的VP1段基因.通過檢測FMDV、VSV、BHK21細胞等,對照的擴增結果均為陰性,驗證其特異.對SVDV RNA進行10倍繫列稀釋後檢測,結果SVDV RNA在10-4稀釋度時仍能檢測到暘性,說明具有較好的敏感性.此項試驗能穩定、高效、快速地檢測齣豬水泡病病毒.
근거기인고중적저수포병병독(SVDV)고도보수적VP1기인적서렬,설계료여SVDV호보적2대특이성인물,통과대영향PCR확증인소적사선,성공지확증출251bp화366bp특이성조대,장기극륭입pMD18-T재체중,병진행서렬측정,여이발표적SVDV기인비교발현,핵감산적동원성위100%,증실위SVDV적VP1단기인.통과검측FMDV、VSV、BHK21세포등,대조적확증결과균위음성,험증기특이.대SVDV RNA진행10배계렬희석후검측,결과SVDV RNA재10-4희석도시잉능검측도양성,설명구유교호적민감성.차항시험능은정、고효、쾌속지검측출저수포병병독.
