放射免疫学杂志
放射免疫學雜誌
방사면역학잡지
JOURNAL OF RADIOMMUNOLOGY
2008年
2期
176-179
,共4页
万玉峰%韩亚萍%蔡洁%赵宏%孔练花%徐桂芳%赵明丽%李军
萬玉峰%韓亞萍%蔡潔%趙宏%孔練花%徐桂芳%趙明麗%李軍
만옥봉%한아평%채길%조굉%공련화%서계방%조명려%리군
乙型肝炎病毒e抗原%真核表达质粒%传代
乙型肝炎病毒e抗原%真覈錶達質粒%傳代
을형간염병독e항원%진핵표체질립%전대
目的:观察构建的真核表达质粒pJW4303/HBe在人胚肾细胞(293T)中的表达.方法:将构建好的质粒pJW4303/HBe经脂质体导入293T细胞中,分别在转染后3d、6d、9d及12d收集上清,同时对转染的细胞进行传代和冻存,传代的细胞收集上清,冻存的细胞复苏后收集上清.运用ELISA检测表达量的变化.结果:转染后3d、6d、9d及12d细胞上清液1:8稀释后HBeAg检测的OD值分别为1.047±0.093、1.494±0.112、0.998±0.087、0.678 ±0.124;不同时间转染传代3d后细胞上清液1:8稀释后HBeAg检测的OD值分别为0.943 ±0.135、1.378 ±0.127、0.791 ±0.145、0.505±0.098,不同时间转染冻存复苏3d后细胞上清液HBeAg检测的OD值分别为0.523 ±0.113、0.742±0.093、0.41 ±0.106、0.261.±0.089.结论:质粒pJW4303/HBe转染293T细胞6d后HBeAg抗原表达量最高,经传代和冻存复苏后的转染细胞仍然能够表达抗原.
目的:觀察構建的真覈錶達質粒pJW4303/HBe在人胚腎細胞(293T)中的錶達.方法:將構建好的質粒pJW4303/HBe經脂質體導入293T細胞中,分彆在轉染後3d、6d、9d及12d收集上清,同時對轉染的細胞進行傳代和凍存,傳代的細胞收集上清,凍存的細胞複囌後收集上清.運用ELISA檢測錶達量的變化.結果:轉染後3d、6d、9d及12d細胞上清液1:8稀釋後HBeAg檢測的OD值分彆為1.047±0.093、1.494±0.112、0.998±0.087、0.678 ±0.124;不同時間轉染傳代3d後細胞上清液1:8稀釋後HBeAg檢測的OD值分彆為0.943 ±0.135、1.378 ±0.127、0.791 ±0.145、0.505±0.098,不同時間轉染凍存複囌3d後細胞上清液HBeAg檢測的OD值分彆為0.523 ±0.113、0.742±0.093、0.41 ±0.106、0.261.±0.089.結論:質粒pJW4303/HBe轉染293T細胞6d後HBeAg抗原錶達量最高,經傳代和凍存複囌後的轉染細胞仍然能夠錶達抗原.
목적:관찰구건적진핵표체질립pJW4303/HBe재인배신세포(293T)중적표체.방법:장구건호적질립pJW4303/HBe경지질체도입293T세포중,분별재전염후3d、6d、9d급12d수집상청,동시대전염적세포진행전대화동존,전대적세포수집상청,동존적세포복소후수집상청.운용ELISA검측표체량적변화.결과:전염후3d、6d、9d급12d세포상청액1:8희석후HBeAg검측적OD치분별위1.047±0.093、1.494±0.112、0.998±0.087、0.678 ±0.124;불동시간전염전대3d후세포상청액1:8희석후HBeAg검측적OD치분별위0.943 ±0.135、1.378 ±0.127、0.791 ±0.145、0.505±0.098,불동시간전염동존복소3d후세포상청액HBeAg검측적OD치분별위0.523 ±0.113、0.742±0.093、0.41 ±0.106、0.261.±0.089.결론:질립pJW4303/HBe전염293T세포6d후HBeAg항원표체량최고,경전대화동존복소후적전염세포잉연능구표체항원.
