中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
7期
581-583
,共3页
李晶华%何侃%佟立全%李杨%高畅%孔维%金英花
李晶華%何侃%佟立全%李楊%高暢%孔維%金英花
리정화%하간%동립전%리양%고창%공유%금영화
Bik基因%克隆%原核表达%纯化
Bik基因%剋隆%原覈錶達%純化
Bik기인%극륭%원핵표체%순화
目的 克隆人Bik基因,并进行表达及纯化.方法 用PCR方法从HeLa细胞cDNA文库中扩增Bik基因,克隆至pGEX-6P-1表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达.表达产物进行GST亲和层析纯化.结果 PCR扩增得到483 bp的DNA片段,重组质粒pGEX-6p-1-Bik经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确.表达的重组蛋白占菌体总蛋白的38%,纯化后蛋白纯度达96%.结论 已成功克隆并利用原核表达系统表达了人Bik基因,为进一步研究Bik蛋白结构和功能奠定了基础.
目的 剋隆人Bik基因,併進行錶達及純化.方法 用PCR方法從HeLa細胞cDNA文庫中擴增Bik基因,剋隆至pGEX-6P-1錶達載體,轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中,IPTG誘導錶達.錶達產物進行GST親和層析純化.結果 PCR擴增得到483 bp的DNA片段,重組質粒pGEX-6p-1-Bik經酶切鑒定和測序分析,錶明構建正確.錶達的重組蛋白佔菌體總蛋白的38%,純化後蛋白純度達96%.結論 已成功剋隆併利用原覈錶達繫統錶達瞭人Bik基因,為進一步研究Bik蛋白結構和功能奠定瞭基礎.
목적 극륭인Bik기인,병진행표체급순화.방법 용PCR방법종HeLa세포cDNA문고중확증Bik기인,극륭지pGEX-6P-1표체재체,전화지대장간균BL21(DE3)중,IPTG유도표체.표체산물진행GST친화층석순화.결과 PCR확증득도483 bp적DNA편단,중조질립pGEX-6p-1-Bik경매절감정화측서분석,표명구건정학.표체적중조단백점균체총단백적38%,순화후단백순도체96%.결론 이성공극륭병이용원핵표체계통표체료인Bik기인,위진일보연구Bik단백결구화공능전정료기출.
