中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
7期
67-70
,共4页
赵瑞宏%张丹俊%潘孝成%程宝艳%胡晓苗
趙瑞宏%張丹俊%潘孝成%程寶豔%鬍曉苗
조서굉%장단준%반효성%정보염%호효묘
鸭肝炎病毒R85952株%VP1基因%克隆%表达
鴨肝炎病毒R85952株%VP1基因%剋隆%錶達
압간염병독R85952주%VP1기인%극륭%표체
为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcDR Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位点的内引物.以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体.用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达.
為研究鴨肝炎病毒VP1基因在大腸桿菌中的錶達情況,根據鴨肝炎病毒覈苷痠序列設計1對外引物和1對含有EcDR Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位點的內引物.以內外引物進行PCR擴增,將所得PCR產物迴收,以相同的限製性內切酶酶切目的基因和錶達載體pET-32a後構建重組錶達載體,併轉入宿主菌BL21和Rosseta,經酶切、PCR和測序鑒定,證明VP1基因正確插入瞭錶達載體.用不同濃度的IPTG誘導VP1基因的錶達,收集菌液進行SDS-PAGE電泳,結果錶明,VP1基因片段在大腸桿菌Rosseta和BL21中均難以錶達.
위연구압간염병독VP1기인재대장간균중적표체정황,근거압간염병독핵감산서렬설계1대외인물화1대함유EcDR Ⅰ화Sal Ⅰ매절위점적내인물.이내외인물진행PCR확증,장소득PCR산물회수,이상동적한제성내절매매절목적기인화표체재체pET-32a후구건중조표체재체,병전입숙주균BL21화Rosseta,경매절、PCR화측서감정,증명VP1기인정학삽입료표체재체.용불동농도적IPTG유도VP1기인적표체,수집균액진행SDS-PAGE전영,결과표명,VP1기인편단재대장간균Rosseta화BL21중균난이표체.
