河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2011年
3期
353-357
,共5页
乔帅%王明凤%杨文博%许君%郑文明
喬帥%王明鳳%楊文博%許君%鄭文明
교수%왕명봉%양문박%허군%정문명
拟南芥%AGL47%转录因子%原核表达%包涵体复性
擬南芥%AGL47%轉錄因子%原覈錶達%包涵體複性
의남개%AGL47%전록인자%원핵표체%포함체복성
AGL47是拟南芥第五染色体上AtSg55690基因编码的1个转录因子,属于MADS-box蛋白质家族,前期研究显示,At5g55690基因受磷胁迫特异诱导表达,极有可能在磷代谢调控中发挥重要的作用.为了进一步鉴定该基因的功能,本研究克隆At5g55690基因全长ORF,构建重组表达载体pPET-28a-At5g55690,转入表达宿主菌E.coli BL21( DE3),在1 mmol· L-1 IPTG诱导下,成功实现了AGL47蛋白的原核表达.可溶性鉴定结果显示,融合蛋白以包涵体的形式存在.对包涵体进行纯化,变性和复性后获得了可溶性目的蛋白.
AGL47是擬南芥第五染色體上AtSg55690基因編碼的1箇轉錄因子,屬于MADS-box蛋白質傢族,前期研究顯示,At5g55690基因受燐脅迫特異誘導錶達,極有可能在燐代謝調控中髮揮重要的作用.為瞭進一步鑒定該基因的功能,本研究剋隆At5g55690基因全長ORF,構建重組錶達載體pPET-28a-At5g55690,轉入錶達宿主菌E.coli BL21( DE3),在1 mmol· L-1 IPTG誘導下,成功實現瞭AGL47蛋白的原覈錶達.可溶性鑒定結果顯示,融閤蛋白以包涵體的形式存在.對包涵體進行純化,變性和複性後穫得瞭可溶性目的蛋白.
AGL47시의남개제오염색체상AtSg55690기인편마적1개전록인자,속우MADS-box단백질가족,전기연구현시,At5g55690기인수린협박특이유도표체,겁유가능재린대사조공중발휘중요적작용.위료진일보감정해기인적공능,본연구극륭At5g55690기인전장ORF,구건중조표체재체pPET-28a-At5g55690,전입표체숙주균E.coli BL21( DE3),재1 mmol· L-1 IPTG유도하,성공실현료AGL47단백적원핵표체.가용성감정결과현시,융합단백이포함체적형식존재.대포함체진행순화,변성화복성후획득료가용성목적단백.
