江西农业学报
江西農業學報
강서농업학보
ACTA AGRICULTURAE JIANGXI
2011年
6期
51-53
,共3页
吴雪霞%查丁石%朱宗文%金海军%李贤
吳雪霞%查丁石%硃宗文%金海軍%李賢
오설하%사정석%주종문%금해군%리현
茄子%RAPD%体系优化
茄子%RAPD%體繫優化
가자%RAPD%체계우화
采用改良的CTAB法提取茄子基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,建立了茄子RAPD-PCR的最佳反应体系:20μL反应体系其中含25 mmol/L MgCl22.0μL、10×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/LdNTP 0.5μL、5 U/μLTaq E 0.2μL、0.1μmol/L Primer 3μL、10 ng/L模板DNA 3μL、灭菌双蒸水9.3μL.扩增程序为:94℃预变性5 min；94℃变性1 min,37℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,45个循环；72℃延伸10 min后4℃保存.
採用改良的CTAB法提取茄子基因組DNA,併通過單因素多水平梯度試驗,比較篩選RAPD擴增體繫的各影響因素,建立瞭茄子RAPD-PCR的最佳反應體繫:20μL反應體繫其中含25 mmol/L MgCl22.0μL、10×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/LdNTP 0.5μL、5 U/μLTaq E 0.2μL、0.1μmol/L Primer 3μL、10 ng/L模闆DNA 3μL、滅菌雙蒸水9.3μL.擴增程序為:94℃預變性5 min；94℃變性1 min,37℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,45箇循環；72℃延伸10 min後4℃保存.
채용개량적CTAB법제취가자기인조DNA,병통과단인소다수평제도시험,비교사선RAPD확증체계적각영향인소,건립료가자RAPD-PCR적최가반응체계:20μL반응체계기중함25 mmol/L MgCl22.0μL、10×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/LdNTP 0.5μL、5 U/μLTaq E 0.2μL、0.1μmol/L Primer 3μL、10 ng/L모판DNA 3μL、멸균쌍증수9.3μL.확증정서위:94℃예변성5 min；94℃변성1 min,37℃퇴화1 min,72℃연신1.5 min,45개순배；72℃연신10 min후4℃보존.
