安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
29期
18072-18074
,共3页
刘文迪%周玉%卢士英%任洪林%李岩松%柳增善%宋芳%郝亚明
劉文迪%週玉%盧士英%任洪林%李巖鬆%柳增善%宋芳%郝亞明
류문적%주옥%로사영%임홍림%리암송%류증선%송방%학아명
Cu2+%抗原合成%鉴定%单克隆抗体
Cu2+%抗原閤成%鑒定%單剋隆抗體
Cu2+%항원합성%감정%단극륭항체
[目的]获得抗Cu2+的单克隆抗体.[方法]以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸( ITCBE)为双功能螯合剂,使Cu2+分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,获得免疫原(Cu-ITCBE-BSA)和检测原(Cu-ITCBE-OVA).用非变性聚丙烯凝胶电泳鉴定偶联结果.免疫Balb/C小鼠,通过细胞融合,获得能稳定分泌抗Cu2的杂交瘤细胞株,并通过亲和层析法纯化腹水获得抗Cu2+的单克隆抗体.[结果]获得了1株能稳定分泌抗Cu2+的单克隆抗体的细胞株(4A6),所分泌的抗体亚类为IgG1,细胞培养上清效价可达1:1.0×103,腹水效价可达1:6.4×105.以该细胞株接种Balb/C小鼠腹腔,获得抗Cu2+的腹水型单抗；该腹水经过亲和层析法纯化后,纯度可达95％.[结论]获得了抗Cu2+的单克隆抗体,为环境水样中Cu2+的免疫学检测奠定基础.
[目的]穫得抗Cu2+的單剋隆抗體.[方法]以異硫氰痠芐基乙二胺四乙痠( ITCBE)為雙功能螯閤劑,使Cu2+分彆與載體蛋白牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶聯,穫得免疫原(Cu-ITCBE-BSA)和檢測原(Cu-ITCBE-OVA).用非變性聚丙烯凝膠電泳鑒定偶聯結果.免疫Balb/C小鼠,通過細胞融閤,穫得能穩定分泌抗Cu2的雜交瘤細胞株,併通過親和層析法純化腹水穫得抗Cu2+的單剋隆抗體.[結果]穫得瞭1株能穩定分泌抗Cu2+的單剋隆抗體的細胞株(4A6),所分泌的抗體亞類為IgG1,細胞培養上清效價可達1:1.0×103,腹水效價可達1:6.4×105.以該細胞株接種Balb/C小鼠腹腔,穫得抗Cu2+的腹水型單抗；該腹水經過親和層析法純化後,純度可達95％.[結論]穫得瞭抗Cu2+的單剋隆抗體,為環境水樣中Cu2+的免疫學檢測奠定基礎.
[목적]획득항Cu2+적단극륭항체.[방법]이이류청산변기을이알사을산( ITCBE)위쌍공능오합제,사Cu2+분별여재체단백우혈청백단백(BSA)、란청단백(OVA)우련,획득면역원(Cu-ITCBE-BSA)화검측원(Cu-ITCBE-OVA).용비변성취병희응효전영감정우련결과.면역Balb/C소서,통과세포융합,획득능은정분비항Cu2적잡교류세포주,병통과친화층석법순화복수획득항Cu2+적단극륭항체.[결과]획득료1주능은정분비항Cu2+적단극륭항체적세포주(4A6),소분비적항체아류위IgG1,세포배양상청효개가체1:1.0×103,복수효개가체1:6.4×105.이해세포주접충Balb/C소서복강,획득항Cu2+적복수형단항；해복수경과친화층석법순화후,순도가체95％.[결론]획득료항Cu2+적단극륭항체,위배경수양중Cu2+적면역학검측전정기출.
