中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2011年
12期
1353-1359
,共7页
蔡松柏%张旭%陈志霞%孔令春%王松坡
蔡鬆柏%張旭%陳誌霞%孔令春%王鬆坡
채송백%장욱%진지하%공령춘%왕송파
结直肠肿瘤%P糖蛋白%NF-κB%复方
結直腸腫瘤%P糖蛋白%NF-κB%複方
결직장종류%P당단백%NF-κB%복방
目的:探讨至真方是否能够调节核因子κB( nuclear factor-κB,NF-κB)并影响P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达与功能.方法:细胞增殖-毒性检验(cell counting kit-8,CCK-8)法鉴定HCT-8/VCR细胞株的多药耐药性.分别用8%、16%、32%体积分数的至真方含药血清干预人大肠癌敏感细胞株HCT-8与多药耐药细胞株HCT-8/VCR,时间为24 h.CCK-8法检测细胞的存活率以筛选含药血清的实验浓度,酶联免疫吸附测定法检测细胞核内NF-κB的转录活性,激光共聚焦显微镜检测P-gp在细胞内的分布,流式细胞仪测定细胞内罗丹明123(rhodamine 123,Rh123)的平均荧光强度.结果:HCT-8/VCR含药血清组NF-κB活性较HCT-8/VCR阴性对照组明显降低(P<0.01),在一定范围内与浓度呈负相关.P-gp逐渐弥漫分布于细胞质和细胞核,并出现核固缩、核裂解,同时平均荧光强度呈浓度梯度下降(P<0.01).在Rh123蓄积实验中,经8%、16%、32%含药血清作用后,HCT-8/VCR细胞波峰右移,细胞内荧光强度明显增强(P<0.01).结论:至真方含药血清能抑制HCT-8/VCR细胞内NF-κB的活性,降低P gp的表达与功能.
目的:探討至真方是否能夠調節覈因子κB( nuclear factor-κB,NF-κB)併影響P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的錶達與功能.方法:細胞增殖-毒性檢驗(cell counting kit-8,CCK-8)法鑒定HCT-8/VCR細胞株的多藥耐藥性.分彆用8%、16%、32%體積分數的至真方含藥血清榦預人大腸癌敏感細胞株HCT-8與多藥耐藥細胞株HCT-8/VCR,時間為24 h.CCK-8法檢測細胞的存活率以篩選含藥血清的實驗濃度,酶聯免疫吸附測定法檢測細胞覈內NF-κB的轉錄活性,激光共聚焦顯微鏡檢測P-gp在細胞內的分佈,流式細胞儀測定細胞內囉丹明123(rhodamine 123,Rh123)的平均熒光彊度.結果:HCT-8/VCR含藥血清組NF-κB活性較HCT-8/VCR陰性對照組明顯降低(P<0.01),在一定範圍內與濃度呈負相關.P-gp逐漸瀰漫分佈于細胞質和細胞覈,併齣現覈固縮、覈裂解,同時平均熒光彊度呈濃度梯度下降(P<0.01).在Rh123蓄積實驗中,經8%、16%、32%含藥血清作用後,HCT-8/VCR細胞波峰右移,細胞內熒光彊度明顯增彊(P<0.01).結論:至真方含藥血清能抑製HCT-8/VCR細胞內NF-κB的活性,降低P gp的錶達與功能.
목적:탐토지진방시부능구조절핵인자κB( nuclear factor-κB,NF-κB)병영향P-당단백(P-glycoprotein,P-gp)적표체여공능.방법:세포증식-독성검험(cell counting kit-8,CCK-8)법감정HCT-8/VCR세포주적다약내약성.분별용8%、16%、32%체적분수적지진방함약혈청간예인대장암민감세포주HCT-8여다약내약세포주HCT-8/VCR,시간위24 h.CCK-8법검측세포적존활솔이사선함약혈청적실험농도,매련면역흡부측정법검측세포핵내NF-κB적전록활성,격광공취초현미경검측P-gp재세포내적분포,류식세포의측정세포내라단명123(rhodamine 123,Rh123)적평균형광강도.결과:HCT-8/VCR함약혈청조NF-κB활성교HCT-8/VCR음성대조조명현강저(P<0.01),재일정범위내여농도정부상관.P-gp축점미만분포우세포질화세포핵,병출현핵고축、핵렬해,동시평균형광강도정농도제도하강(P<0.01).재Rh123축적실험중,경8%、16%、32%함약혈청작용후,HCT-8/VCR세포파봉우이,세포내형광강도명현증강(P<0.01).결론:지진방함약혈청능억제HCT-8/VCR세포내NF-κB적활성,강저P gp적표체여공능.