生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2003年
3期
5-6
,共2页
李彬%蔡英林%韩忠朝%郭娟%顾洁%刘澎
李彬%蔡英林%韓忠朝%郭娟%顧潔%劉澎
리빈%채영림%한충조%곽연%고길%류팽
血小板生成素%碱性成纤维生长因子%肝素结合位点%DNA序列分析
血小闆生成素%堿性成纖維生長因子%肝素結閤位點%DNA序列分析
혈소판생성소%감성성섬유생장인자%간소결합위점%DNA서렬분석
采用PCR技术,根据文献报道的鼠TPO成熟肽基因序列,设计并合成两对引物,以鼠TPO cDNA为模板,扩增获得mTPO N端153个氨基酸的478bp cDNA片段及鼠TPO全长1032bp cDNA片段;mTPO153片段与合成的碱性成纤维生长因子序列中Lys119-Lys135aa的51bp肝素结合位点DNA片段连接,克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序;同时将扩增的鼠TPO全长cDNA片段克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序,证明获得鼠血小板生成素与肝素结合位点基因及鼠TPO全长基因,继之以pMAL-C2X为表达载体构建表达质粒,并经PCR及酶切鉴定.
採用PCR技術,根據文獻報道的鼠TPO成熟肽基因序列,設計併閤成兩對引物,以鼠TPO cDNA為模闆,擴增穫得mTPO N耑153箇氨基痠的478bp cDNA片段及鼠TPO全長1032bp cDNA片段;mTPO153片段與閤成的堿性成纖維生長因子序列中Lys119-Lys135aa的51bp肝素結閤位點DNA片段連接,剋隆到M13mp18及M13mp19載體中進行雙嚮測序;同時將擴增的鼠TPO全長cDNA片段剋隆到M13mp18及M13mp19載體中進行雙嚮測序,證明穫得鼠血小闆生成素與肝素結閤位點基因及鼠TPO全長基因,繼之以pMAL-C2X為錶達載體構建錶達質粒,併經PCR及酶切鑒定.
채용PCR기술,근거문헌보도적서TPO성숙태기인서렬,설계병합성량대인물,이서TPO cDNA위모판,확증획득mTPO N단153개안기산적478bp cDNA편단급서TPO전장1032bp cDNA편단;mTPO153편단여합성적감성성섬유생장인자서렬중Lys119-Lys135aa적51bp간소결합위점DNA편단련접,극륭도M13mp18급M13mp19재체중진행쌍향측서;동시장확증적서TPO전장cDNA편단극륭도M13mp18급M13mp19재체중진행쌍향측서,증명획득서혈소판생성소여간소결합위점기인급서TPO전장기인,계지이pMAL-C2X위표체재체구건표체질립,병경PCR급매절감정.
