细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2004年
2期
183-185
,共3页
王平%王润田%王丽%王从印%佟慧%李全海%杨丽娟
王平%王潤田%王麗%王從印%佟慧%李全海%楊麗娟
왕평%왕윤전%왕려%왕종인%동혜%리전해%양려연
包涵体蛋白%人IL-15%单克隆抗体%ELISA
包涵體蛋白%人IL-15%單剋隆抗體%ELISA
포함체단백%인IL-15%단극륭항체%ELISA
目的:制备鼠抗人白细胞介素15(hIL-15)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法:自重组人白细胞介素15(rhIL-15)基因工程菌中,提取融合蛋白GST-IL-15,以120/LSDS-PAGE分离鉴定,切取含有目的条带的凝胶,免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行HAT选择培养,间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及克隆化.对杂交瘤细胞株的稳定性及其分泌的mAb的特性进行鉴定.另外,以rhIL-15包涵体蛋白(rhIL-15IBP)免疫新西兰白兔,制备抗hIL-15的多克隆抗体(多抗).用抗hIL-15的mAb与多抗建立双抗体夹心间接ELISA.结果:获得1株可稳定分泌特异性抗hIL-15 mAb的杂交瘤细胞.建立了双抗体夹心间接ELISA,检测rhIL-15蛋白的敏感性达10μg/L.结论:成功地制备抗hIL-15 mAb,并建立了一种可用于hIL-15检测的双抗体夹心间接ELISA.
目的:製備鼠抗人白細胞介素15(hIL-15)單剋隆抗體(mAb),併鑒定其特性.方法:自重組人白細胞介素15(rhIL-15)基因工程菌中,提取融閤蛋白GST-IL-15,以120/LSDS-PAGE分離鑒定,切取含有目的條帶的凝膠,免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾細胞與Sp2/0骨髓瘤細胞常規融閤,依次進行HAT選擇培養,間接ELISA法篩選抗體暘性的雜交瘤細胞及剋隆化.對雜交瘤細胞株的穩定性及其分泌的mAb的特性進行鑒定.另外,以rhIL-15包涵體蛋白(rhIL-15IBP)免疫新西蘭白兔,製備抗hIL-15的多剋隆抗體(多抗).用抗hIL-15的mAb與多抗建立雙抗體夾心間接ELISA.結果:穫得1株可穩定分泌特異性抗hIL-15 mAb的雜交瘤細胞.建立瞭雙抗體夾心間接ELISA,檢測rhIL-15蛋白的敏感性達10μg/L.結論:成功地製備抗hIL-15 mAb,併建立瞭一種可用于hIL-15檢測的雙抗體夾心間接ELISA.
목적:제비서항인백세포개소15(hIL-15)단극륭항체(mAb),병감정기특성.방법:자중조인백세포개소15(rhIL-15)기인공정균중,제취융합단백GST-IL-15,이120/LSDS-PAGE분리감정,절취함유목적조대적응효,면역BALB/c소서.취면역소서적비세포여Sp2/0골수류세포상규융합,의차진행HAT선택배양,간접ELISA법사선항체양성적잡교류세포급극륭화.대잡교류세포주적은정성급기분비적mAb적특성진행감정.령외,이rhIL-15포함체단백(rhIL-15IBP)면역신서란백토,제비항hIL-15적다극륭항체(다항).용항hIL-15적mAb여다항건립쌍항체협심간접ELISA.결과:획득1주가은정분비특이성항hIL-15 mAb적잡교류세포.건립료쌍항체협심간접ELISA,검측rhIL-15단백적민감성체10μg/L.결론:성공지제비항hIL-15 mAb,병건립료일충가용우hIL-15검측적쌍항체협심간접ELISA.
