中国矫形外科杂志
中國矯形外科雜誌
중국교형외과잡지
THE ORTHOPEDIC JOURNAL OF CHINA
2004年
15期
1161-1165
,共5页
董海%陆骅%周之德%汤亭亭%陈晓东%史桂英
董海%陸驊%週之德%湯亭亭%陳曉東%史桂英
동해%륙화%주지덕%탕정정%진효동%사계영
间充质干细胞%骨髓%传代培养%骨生成%流式细胞术%表面分子%诱导分化
間充質榦細胞%骨髓%傳代培養%骨生成%流式細胞術%錶麵分子%誘導分化
간충질간세포%골수%전대배양%골생성%류식세포술%표면분자%유도분화
目的:研究体外培养的各代间充质干细胞(MSCs)及其成骨分化后的部分细胞表面抗原变化.方法:将体外普通培养的骨髓间充质干细胞,每隔1代在流式细胞仪上检测CD48、CD56、CD71和CD90阳性表达率.另外,为促进成人MSCs体外成骨性分化,第1传代培养时加入成骨性添加剂,培养第6、12、18、24、30d时,也分别用流式细胞仪分析上述MSCs表面抗原的表达,并用碱性磷酸酶组化染色和Von Kossa染色.结果:(1)在普通培养条件下(10%DMEM),从第1代起,MSC的表面抗原CD48、CD56、CD71、CD90都呈阳性表达.(2)诱导培养的MSCs表面抗原CD48、CD90阳性表达率在诱导第12、18、24及30d时,分别与第6d相比都有显著差异.(3)在成骨诱导条件下,MSCs表现出AKP染色增强和Von Kossa染色可见钙化的基质沉积.当MSC开始向成骨细胞分化后,CD71阳性率下降最明显.结论:(1)目前采用的体外普通培养条件下,培养、传代方法对MSCs表面抗原CD48,CD56,CD71及CD90表达并无明显影响.(2)诱导成骨培养的MSCs的CD71从高阳性率转变为极低阳性率可能与MSCs向成骨细胞系的分化成熟相对应.(3)CD90及CD48也可能与MSCs的细胞分化状态特别是向成骨细胞系的改变有关.
目的:研究體外培養的各代間充質榦細胞(MSCs)及其成骨分化後的部分細胞錶麵抗原變化.方法:將體外普通培養的骨髓間充質榦細胞,每隔1代在流式細胞儀上檢測CD48、CD56、CD71和CD90暘性錶達率.另外,為促進成人MSCs體外成骨性分化,第1傳代培養時加入成骨性添加劑,培養第6、12、18、24、30d時,也分彆用流式細胞儀分析上述MSCs錶麵抗原的錶達,併用堿性燐痠酶組化染色和Von Kossa染色.結果:(1)在普通培養條件下(10%DMEM),從第1代起,MSC的錶麵抗原CD48、CD56、CD71、CD90都呈暘性錶達.(2)誘導培養的MSCs錶麵抗原CD48、CD90暘性錶達率在誘導第12、18、24及30d時,分彆與第6d相比都有顯著差異.(3)在成骨誘導條件下,MSCs錶現齣AKP染色增彊和Von Kossa染色可見鈣化的基質沉積.噹MSC開始嚮成骨細胞分化後,CD71暘性率下降最明顯.結論:(1)目前採用的體外普通培養條件下,培養、傳代方法對MSCs錶麵抗原CD48,CD56,CD71及CD90錶達併無明顯影響.(2)誘導成骨培養的MSCs的CD71從高暘性率轉變為極低暘性率可能與MSCs嚮成骨細胞繫的分化成熟相對應.(3)CD90及CD48也可能與MSCs的細胞分化狀態特彆是嚮成骨細胞繫的改變有關.
목적:연구체외배양적각대간충질간세포(MSCs)급기성골분화후적부분세포표면항원변화.방법:장체외보통배양적골수간충질간세포,매격1대재류식세포의상검측CD48、CD56、CD71화CD90양성표체솔.령외,위촉진성인MSCs체외성골성분화,제1전대배양시가입성골성첨가제,배양제6、12、18、24、30d시,야분별용류식세포의분석상술MSCs표면항원적표체,병용감성린산매조화염색화Von Kossa염색.결과:(1)재보통배양조건하(10%DMEM),종제1대기,MSC적표면항원CD48、CD56、CD71、CD90도정양성표체.(2)유도배양적MSCs표면항원CD48、CD90양성표체솔재유도제12、18、24급30d시,분별여제6d상비도유현저차이.(3)재성골유도조건하,MSCs표현출AKP염색증강화Von Kossa염색가견개화적기질침적.당MSC개시향성골세포분화후,CD71양성솔하강최명현.결론:(1)목전채용적체외보통배양조건하,배양、전대방법대MSCs표면항원CD48,CD56,CD71급CD90표체병무명현영향.(2)유도성골배양적MSCs적CD71종고양성솔전변위겁저양성솔가능여MSCs향성골세포계적분화성숙상대응.(3)CD90급CD48야가능여MSCs적세포분화상태특별시향성골세포계적개변유관.
