中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2007年
4期
6-9
,共4页
王进产%闫文朝%张龙现%宁长申%朱惠丽%梁楠%王海燕%王荣军
王進產%閆文朝%張龍現%寧長申%硃惠麗%樑楠%王海燕%王榮軍
왕진산%염문조%장룡현%저장신%주혜려%량남%왕해연%왕영군
隐孢子虫%猪%Hsp70%基因型
隱孢子蟲%豬%Hsp70%基因型
은포자충%저%Hsp70%기인형
从河南两个地区猪的粪便中分离纯化了猪源隐孢子虫卵囊.参考隐孢子虫Hsp70基因属特异性引物,用PCR分别扩增了卵囊基因组DNA大小均为1 948 bp的片段,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化,纯化后PCR产物直接测序.将测得的序列和推测出的氨基酸序列分别用ClustalX软件与已报道的相应序列比对,用DNASTAR中的MegAlign分析其同源性,并用PAUP绘制系统发育进化树.序列分析结果显示河南猪源隐孢子虫两个分离株Hsp70 DNA序列的同源性为99.9%,与其他隐孢子虫相应序列同源性介于81.9%～99.8%之间,其中与猪隐孢子虫(Cryptosporidium suis,AF221533)同源性最高分别为99.8%,97.9%;与安氏隐孢子虫(C.andersoni,AY954592)同源性最低.两个分离株推导Hsp70氨基酸序列的同源性为100%,同其他隐孢子虫相关序列的同源性在92.8%～99.8%之间.本研究为隐孢子虫诊断及流行病学研究打下了良好基础.
從河南兩箇地區豬的糞便中分離純化瞭豬源隱孢子蟲卵囊.參攷隱孢子蟲Hsp70基因屬特異性引物,用PCR分彆擴增瞭卵囊基因組DNA大小均為1 948 bp的片段,PCR產物經電泳鑒定後用試劑盒迴收純化,純化後PCR產物直接測序.將測得的序列和推測齣的氨基痠序列分彆用ClustalX軟件與已報道的相應序列比對,用DNASTAR中的MegAlign分析其同源性,併用PAUP繪製繫統髮育進化樹.序列分析結果顯示河南豬源隱孢子蟲兩箇分離株Hsp70 DNA序列的同源性為99.9%,與其他隱孢子蟲相應序列同源性介于81.9%～99.8%之間,其中與豬隱孢子蟲(Cryptosporidium suis,AF221533)同源性最高分彆為99.8%,97.9%;與安氏隱孢子蟲(C.andersoni,AY954592)同源性最低.兩箇分離株推導Hsp70氨基痠序列的同源性為100%,同其他隱孢子蟲相關序列的同源性在92.8%～99.8%之間.本研究為隱孢子蟲診斷及流行病學研究打下瞭良好基礎.
종하남량개지구저적분편중분리순화료저원은포자충란낭.삼고은포자충Hsp70기인속특이성인물,용PCR분별확증료란낭기인조DNA대소균위1 948 bp적편단,PCR산물경전영감정후용시제합회수순화,순화후PCR산물직접측서.장측득적서렬화추측출적안기산서렬분별용ClustalX연건여이보도적상응서렬비대,용DNASTAR중적MegAlign분석기동원성,병용PAUP회제계통발육진화수.서렬분석결과현시하남저원은포자충량개분리주Hsp70 DNA서렬적동원성위99.9%,여기타은포자충상응서렬동원성개우81.9%～99.8%지간,기중여저은포자충(Cryptosporidium suis,AF221533)동원성최고분별위99.8%,97.9%;여안씨은포자충(C.andersoni,AY954592)동원성최저.량개분리주추도Hsp70안기산서렬적동원성위100%,동기타은포자충상관서렬적동원성재92.8%～99.8%지간.본연구위은포자충진단급류행병학연구타하료량호기출.
